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技術(shù)文章
PVDF膜蛋白染色步驟
點擊次數(shù)：5889 發(fā)布時間：2012-6-6
一、所需試劑
1. 2%麗春紅S濃貯存液（3-羥基-4-[2-磺基-4-硫代-苯偶氮基]-2，7-萘二磺酸）：溶于30%三氯醋酸和30%磺基水楊酸中。貯存液可在室溫下穩(wěn)定存放1年以上。
2. PBS。www.runwelltac.com
二、操作步驟
1. 在染色之前，先配制麗春紅S的應(yīng)用液。即將2%的麗春紅S濃貯存液用1%醋酸1:10稀釋即成為應(yīng)用液（注意：如果使用硝酸纖維膜，須將麗春紅S應(yīng)用液更換為用水1:10稀釋）；
2. 用麗春紅S應(yīng)用液將PVDF膜洗1次；
3. 加入新鮮稀釋的麗春紅S應(yīng)用液，并在室溫下攪動5~10min；
4. 將PVDF膜放入PBS中漂洗數(shù)次，每次1~2min，并更換PBS；
5. 根據(jù)需要將轉(zhuǎn)印部位和分子量標(biāo)準(zhǔn)位置進行標(biāo)記，至此PVDF膜可用于封閉和加入抗體。
PVDF膜-GE品牌，貨號RPN303F，說明書鏈接：www.gelifesciences.com/gehcls_images/GELS/Related%20Content/Files/1321702883482/msds25006567__ENSaf_20111119125238.pdf
PVDF膜-羅氏品牌，貨號3010040001，說明書鏈接：
e-labdoc.roche.com/LFR_PublicDocs/ras/03010040001_en_07.pdf