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各種常見(jiàn)緩沖液的配制方法
點(diǎn)擊次數(shù)：12301 發(fā)布時(shí)間：2012-8-10
磷酸鹽緩沖液，Tris緩沖液和檸檬酸緩沖液等是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液，也是PeproTech重組細(xì)胞因子和蛋白溶解所需的常用緩沖液。然而，這些緩沖液的配制比較麻煩，尤其當(dāng)要獲得特定pH值的緩沖液時(shí)，調(diào)節(jié)pH值是費(fèi)力、費(fèi)時(shí)的事情。對(duì)于Tris等緩沖液等，pH計(jì)是無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)量其pH值的。
那么，有沒(méi)有簡(jiǎn)便的方法來(lái)配制特定濃度和pH值的上述緩沖液呢？
美國(guó)PeproTech公司為此精心設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)出一個(gè)網(wǎng)上實(shí)用工具--http://www.peprotech-asia.com/convertor/ch/phosphate.html。只要將你所需配置的濃度，pH值，以及配制的體積在上相應(yīng)的位置輸入或選定，即可計(jì)算出配制該溶液所需各組分的重量或體積，然后稱(chēng)取相應(yīng)重量或體積的組分即可配制出您所需的緩沖液。
該網(wǎng)上工具包括以下內(nèi)容：
1） 配制磷酸鹽緩沖液
由一定量的Na2HPO4和NaH2PO4混合而得。
2） 配制檸檬酸（鹽）緩沖液
由Citric Acid（檸檬酸）和Trisodium Citrate（檸檬酸鈉）混合而得。
3） 配制醋酸溶液
在水中加入一定體積的醋酸而得。
4） 配制Tris緩沖液
由一定量的Tris HCl（Tris酸）和Tris Base（Tris堿）混合而得。
5） 重量與摩爾數(shù)轉(zhuǎn)換工具
已知一蛋白的分子量（kDa），可由重量推算出摩爾數(shù)和分子數(shù)，以及在一定體積內(nèi)摩爾濃度。相反，也可由一個(gè)蛋白的摩爾數(shù)推算出重量和分子數(shù)，以及由摩爾濃度推算出所含的蛋白質(zhì)量。
附：這些緩沖液在溶解PeproTech公司重組細(xì)胞因子和蛋白中的應(yīng)用舉例
1） 磷酸鹽緩沖液
1 x PBS用于溶解100-19 Human KGF 和100-52 Human FGF-23等。
2） 檸檬酸（鹽）緩沖液
5mM檸檬酸鈉（pH 8.0）用于溶解100-17A Human FGF-acidic, 10mM檸檬酸（pH 3.0）用于溶解100-21 Human TGF-b1等。
3） 醋酸溶液
10mM醋酸用于溶解120-10 Human Noggin和120-20 Human WISP-3等。
4） Tris緩沖液
5mM Tris（pH 7.6）用于溶解100-18B Human FGF-basic，10mM Tri（pH 8.0）用于溶解100-25 Human FGF-8。