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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第18年

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檢測(cè)植物elisa試劑盒操作步驟

時(shí)間:2021/9/24閱讀:2165
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檢測(cè)植物試劑盒操作步驟:

1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)

2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 a50μl,再加入顯色劑 b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn))。

11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(od 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。


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計(jì)算和結(jié)果判定:

試驗(yàn)有效性:陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00 陰性對(duì)照平均值≤0.10

臨界值(cut off)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值 0.15

陰性判定:樣品 od 值< 臨界值(cut off)者為金葡萄球菌腸毒素(se)陰性 陽(yáng)性判定:樣品 od 值≥ 臨界值(cut off)者為金葡萄球菌腸毒素(se)陽(yáng)性。

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