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研域(上海)化學試劑有限公司
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ELISA試劑盒實驗誤差注意事項

時間:2014-4-28閱讀:967
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ELISA試劑盒可以簡單、地從瓊脂糖凝膠上純化回收DNA段,同時除去蛋白質、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質。可回收100bp–40 kb DNA段,可純化高達10μg的DNA段,回收率可達80%以上(<100bp或>10kb的DNA段回收率為30–50%)。使用ELISA試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉化等各種分子生物學實驗。
ELISA試劑盒注意事項:
1、 不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同,務必按照所用試劑盒嚴格操作,否則容易產生檢測結果的不確定性.
2、 若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現顯色淺或本底高,花板等情形。
3、 加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響很大,建議校對加樣器。
4、 反應時間的誤差,做大量標本時,*孔和zui后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產生氣泡、速度是否均勻,是否顫動等影響液量的因素均可導致以上情況。高標準要求時應使用加樣器。
6、 閾值附近實際上是個灰區(gray scale),不能截然分為陰性、陽性,國外廠家均要求對這部分可疑標本進行奇數次復檢,以次數多者為準,如一次陽兩次陰zui后判為陰,但實際上是否為陰不好說,只有判為可疑,臨床上可以讓患者過一段時間后再測。
7、 肉眼觀察稍顯色,酶標儀打印為陰性的標本在實際工作中是難以避免的,肉眼目測結果不可靠,應以酶標儀判讀為準。
8、 由陰性變為強陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關。
9、 臨界值附近標本波動為正常現象,任何試劑均不可避免。可以考慮將標本做奇數次復檢。

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