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北京西美杰科技有限公司
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更新時間：2024-06-14 15:50:07瀏覽次數：572
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耐高鹽全能核酸酶DENARASE® High Salt
DENARASE® High Salt 是一種經過生物工程改造的野生型 Serratia marcescens 內切酶，通常用于生物工藝中的 DNA 去除。與野生型 DENARASE® 相比，該酶的幾個氨基酸被替換以提高其耐鹽性，而不會失去其對核酸的特異性。DENARASE® High Salt 在更廣泛的鹽濃度和 pH 范圍內保持更高的活性，為客戶提供了更大的工藝靈活性，同時為病毒載體制造工藝提升成本效益，尤其是在需要較高鹽濃度的條件下。由于與野生型核酸內切酶具有很高的相似性，DENARASE® High Salt 可以使用與野生型酶相同的核酸內切酶 ELISA試劑盒進行檢測，例如DENARASE® ELISA試劑盒，Cygnus核酸內切酶殘留檢測試劑盒（EonucleaseGTP ELISA，貨號F960）。
DENARASE® High Salt的生產采用c-LEcta成熟的專''利DENARASE®生產工藝，該工藝采用革蘭氏陽性芽孢桿菌菌株（Bacillus.sp.）表達，大大降低了內毒素殘留風險。該酶按照ISO 9001標準生產，不使用抗生素和動物源性原料或TSE/BSE風險原料。
DENARASE® High Salt酶特性
DENARASE® High Salt是專為在更高、與工藝相關的鹽濃度下實現DNA清除活性而設計的。該工程酶在0-500 mM一價陽離子濃度范圍內具有活性（見圖1）。
圖1. NaCl對酶活性影響
鎂離子（Mg2+）是確保DENARASE® High Salt發揮酶活性所必需的輔因子。DENARASE® High Salt在低鎂離子濃度（5-25 mM Mg2+）下具有基本活性，但在高鎂離子濃度（>25 mM Mg2+）下酶活性會降低。因此，在使用DENARASE® High Salt時，應確保鎂離子濃度在適當范圍內（見圖2）。
圖2. Mg2+對酶活性影響
DENARASE® High Salt產品為液體形式，配方為20 mM Tris-HCl（pH 7.4±0.2）、250 mM NaCl、5 mM MgCl2和50%（體積比）甘油。
項目 | 方法 | 質量標準 |
產品性狀 | 直接觀測 | 澄清透明液體 |
酶活性 | 光學測定1 | >250 U/µL |
純度 | SDS-PAGE和銀染 | ≥ 99% |
比活性 | 光學測定單位蛋白具有的酶活性即280 nm下44,600 L x mol-1 x cm-1的摩爾消光系數 | >5 x 105 U/mg |
內毒素 | LAL-Test，參考 Ph. Eur. 2.6.14, 方法C | <0.25 EU/kU |
總菌落數 | TAMC/TYMC 參照 Ph. Eur. 2.6.12 | 需氧菌: < 5 cfu/200 µL 酵母: < 5 cfu/200 µL |
1. Unit定義: 每個活性單位 (U) 是指在37 °C ，pH 8.0 條件下，在30分鐘內將鮭魚精DNA消化至相當于ΔA260nm值為1.0 的酸溶性寡聚核苷酸。
DENARASE® High Salt產品參數
分子量： 27 kDa
最適pH： pH 7.4 - 9.0
最適反應溫度：37 °C
等電點(pI)：7.831
輔因子：Mg2+
耐高鹽全能核酸酶DENARASE® High Salt
DENARASE® High Salt訂購信息
品名 | 貨號 | 規格 |
DENARASE High Salt 25 kU | 22002-25k | 25 kU |
DENARASE High Salt 100 kU | 22002-100k | 100 kU |
DENARASE High Salt 500 kU | 22002-500k | 500 kU |
DENARASE High Salt 1000 kU | 22002-1000k | 1000 kU |
DENARASE High Salt 5000 kU | 22002-5000k | 5000 kU |
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