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| 說明： |
介紹用于RT-PCR的*鏈合成系統(tǒng)進行了優(yōu)化以合成*鏈cDNA，從純化的poly（A）+或總RNA。這個系統(tǒng)可以檢測RNA的目標從100個基點，至12 KB。的起始材料的量，可以改變從1微克到5微克的總RNA。逆轉錄酶是一個版本的M-MLV逆轉錄，已設計，以減少RNase H活性，并提供增強的熱穩(wěn)定性。使用酶cDNA的合成在42-55℃下的溫度范圍內(nèi)，提供更高的特異性，高產(chǎn)量的cDNA，和更完整長度的產(chǎn)品比其他的逆轉錄酶。用于RT由于合成系統(tǒng)還沒有顯著地抑制核糖體和轉移RNA，它可用于從總RNA制備*鏈cDNA的合成。 在*步驟中，使用總RNA或聚（A）+選擇的引物用寡聚（dT），隨機引物，或一個基因特異性引物的RNA進行cDNA合成。在第二步驟中，在一個單獨的管，使用感興趣的基因的特異性引物進行PCR。 儲存及穩(wěn)定性1年，儲存于-20℃下儲存在-20℃下，用于RT-PCR的*鏈合成系統(tǒng)是穩(wěn)定的 |
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