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超聲波細胞粉碎儀的常見問題
閱讀：5164 發(fā)布時間：2012-5-8一、問：鏈霉菌超聲破碎的，用的方法條件是什么？
答：前處理一般就是配置成一定濃度的菌懸液。使用超聲波細胞粉碎儀進行超聲破碎時采用的具體條件是：
1、取細菌的 24 h 培養(yǎng)液于 5 000 r／min 下離心 5 min 收集菌體．
2、用 pH 7．5 的 Na2HPO -NaH2PO 緩沖液洗滌 3 次，再用該緩沖液將菌體配成 1： 3 的菌懸液．置于 40 mL 大塑料試管內(nèi)．
3、將大塑料試管置于冰浴中，采用超聲波破碎（功率 200 W，1／2”探頭，破碎 30 s，間歇 30 S）．
4、破碎液于 12 000 r／min下高速冷凍離心 30 min，收集細胞碎片和上清液，超聲破菌流程與 上述基本一致，就是洗滌菌體也可以用預(yù)冷的生理鹽水或 pH8 的 Tris－HCl，洗滌一次就可以。另外超聲劑量隨樣品量、菌體改變比較大，功率可以到 400－600w，超 5s，停 5s，冰浴，要加終濃度 1 mM 的 PMSF。為確定合適的超聲強度和次數(shù)，有必要隨時鏡檢觀察菌體是否*破碎。放線菌屬于原核生物系統(tǒng)進化樹上的（G＋C）摩爾百分含量（mol％）高的革蘭氏陽性菌分枝類群。在做大腸桿菌超聲時，采用的是 400W超聲波細胞粉碎儀，超5停5的方法，效果不錯，但是用在鏈霉菌上，似乎沒什么效果。會不會就是由于細胞壁組成差異造成的呢，因為大腸桿菌式屬于革蘭氏陰性菌的。
二、超聲波細胞粉碎儀結(jié)構(gòu)上有啥特點？
超聲波細胞粉碎儀的主要特點有一下幾個方面：
1、超聲波細胞粉碎儀可儲存5個控制模式。
2、定時數(shù)字顯示，輸出能量由光條顯示，0～100%連續(xù)可調(diào)，操作直觀方便。
3、超聲波細胞粉碎儀工作方式有間斷和連續(xù)兩種選擇，間斷工作時，脈沖寬度和間斷時間可分別設(shè)定。
4、工作時間可由數(shù)字定時器控制，達到預(yù)定時間自動轉(zhuǎn)變?yōu)榇龣C狀態(tài)，定時范圍1min～99min。
5、手持式超聲波細胞粉碎儀可人為自由控制工作和截止時間，使用靈活方便，適用于少量樣品的處理工作。
文章由先歐超聲波細胞破碎儀提供