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凱氏定氮法原理及計算法方程式

時間:2013/7/15閱讀:21442
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 什么是凱氏定氮法?

 

簡單地說,凱氏定氮法是一種檢測物質中“氮的含量”的方法。蛋白質是一種含氮的有機化合物,食品中的蛋白質經硫酸和催化劑分解后,產生的氨能夠與硫酸結合,生成硫酸氨,再經過堿化蒸餾后,氨即成為游離狀態,游離氨經硼酸吸引,再以硫酸或鹽酸的標準溶液進行滴定,根據酸的消耗量再乘以換算系數,就可以推算出食品中的蛋白含量。

凱氏定氮儀/定氮法原理
凱氏定氮法首先將含氮有機物與濃硫酸共熱,經一系列的分解、碳化和氧化還原反應等復雜過程,zui后有機氮轉變為無機氮硫酸銨,這一過程稱為有機物的消化。為了加速和*有機物質的分解,縮短消化時間,在消化時通常加入硫酸鉀、硫酸銅、yang hua gong、過氧化氫等試劑,加入硫酸鉀可以提高消化液的沸點而加快有機物分解,除硫酸鉀外,也可以加入硫酸鈉、氯化鉀等鹽類類提高沸點,但效果不如硫酸鉀。硫酸銅起催化劑的作用。凱氏定氮法中可用的催化劑種類很多,除硫酸銅外,還有yang hua gong、汞、硒粉、鉬酸鈉等,但考慮到效果、價格及環境污染等多種因素,應用zui廣泛的是硫酸銅。使用時常加入少量過氧化氫、次氯酸鉀等作為氧化劑以加速有機物氧化。消化完成后,將消化液轉入凱氏定氮儀反應室,加入過量的濃氫氧化鈉,將NH4+轉變成NH3,通過蒸餾把NH3驅入過量的硼酸溶液接受瓶內,硼酸接受氨后,形成四硼酸銨,然后用標準鹽酸滴定,直到硼酸溶液恢復原來的氫離子濃度。滴定消耗的標準鹽酸摩爾數即為NH3的摩爾數,通過計算即可得出總氮量。在滴定過程中,滴定終點采用甲基紅-次甲基藍混合指示劑顏色變化來判定。測定出的含氮量是樣品的總氮量,其中包括有機氮和無機氮。
反應式如下:

1.有機物中的氮在強熱和CuSO4,濃H2SO4 作用下,消化生成(NH4)2SO4 

反應式為: 

  H2SO4==SO2+H2O+[O]

                      R. CH.COOH+[O]==R.CO.COOH+NH3

                         NH3

                      R.CO.COOH+[O]==nCO2+mH2O

                      2NH3+H2SO4==(NH4)2SO4

2.在凱氏定氮器中與堿作用,通過蒸餾釋放出NH3 ,收集于 H3BO3 溶液中

反應式為: 

 2NH4++OH-==NH3+H2O

                      NH3+H3BO3==NH4++H2BO3-

3. 再用已知濃度的HCI標準溶液滴定,根據HCI消耗的量計算出氮的含量,然后乘以相應的換算因子,既得蛋白質的含量。

反應式為: 

 H2BO3-+H+==H3BO3


蛋白質是一類復雜的含氮化合物,每種蛋白質都有其恒定的含氮量[約在14%~18%,平均為16%(質量分數)]。凱氏定氮法測定出的含氮量,再乘以系數6.25,即為蛋白質含量。

 

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