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PH范圍色譜柱基本要求和選擇活動要點(diǎn)
PH范圍色譜柱基本要求
①與固定相不互溶，不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
②對樣品有適宜的溶解度，要求k值在可用范圍。溶解度太大，k值太小，不利于分離；溶解度太小，k值太大，可能使樣品在活動相中產(chǎn)生沉淀。
③必須與檢測器相適應(yīng)。例如用紫外檢測器，活動相本身在檢測波優(yōu)點(diǎn)應(yīng)無吸收。
④活動相的粘度要小，可以降低色譜柱的阻力而進(jìn)步柱效。
⑤純度高，不含機(jī)械雜質(zhì)。
PH范圍色譜柱選擇活動時(shí)需要考慮
①活動相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時(shí)碰到某些有機(jī)相會溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性活動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性活動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。
②純度。色譜柱的壽命與大量活動相通過有關(guān)，特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時(shí)。
③必須與檢測器匹配。使用UV檢測器時(shí)，所用活動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收，或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測器時(shí)，應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作活動相，以進(jìn)步靈敏度。
④粘度要低
⑤對樣品的溶解度要適宜。假如溶解度欠佳，樣品會在柱頭沉淀，不但影響了純化分離，且會使柱子惡化。
⑥樣品易于回收。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。