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微生物檢測中如何應(yīng)用恒溫培養(yǎng)箱
常規(guī)菌檢測的目的是一種指示菌，一般以CFU/ML來計(jì)量，比如總菌數(shù)和大腸菌群，這兩個(gè)一般是用來評價(jià)食品被污染的程度，因?yàn)榘闯＠?，我們生活?dāng)中接觸的致病菌還是相對較少的，而且人體本身也具有免疫功能，所以如果這兩個(gè)指示菌如果不超標(biāo)的話，我們就有理由相信該食品是相對安全的，注意：不是安全。所以我們就要對微生物進(jìn)行檢測，二恒溫培養(yǎng)箱是檢測中*的。
傳統(tǒng)的檢測方法也很簡單，一般就是培養(yǎng)富集后計(jì)數(shù)，其大致流程是這樣：
1）取樣，一般都是取25g樣品加入到225ml的生理鹽水中，取樣方法會根據(jù)樣品不同有所不同。比如肉制品，可以用剪刀剪碎。
2）計(jì)數(shù)，找一個(gè)比較容易計(jì)數(shù)的梯度進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后根據(jù)稀釋倍數(shù)反推出樣品中的微生物，計(jì)數(shù)說簡單點(diǎn)就是數(shù)菌落的數(shù)量，如果你涂抹夠開的話，每個(gè)培養(yǎng)前的微生物會長成一個(gè)菌落，所以個(gè)1個(gè)菌落就代表1個(gè)使用恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)前的微生物。（說到這，我就想起我以前老是想，一個(gè)菌落是由很多個(gè)微生物組成的，光數(shù)菌落怎么會得出樣品中微生物的個(gè)數(shù)呢？這就是沒有考慮培養(yǎng)前與培養(yǎng)后的變化。
3）稀釋，一般來說稀釋3個(gè)梯度，10倍，100倍，1000倍，而且每個(gè)稀釋梯度要倒兩個(gè)平板。
4）均質(zhì)，要保證均質(zhì)的力度不能太大，如果太大有可能損害樣品中的微生物，有些檢驗(yàn)人員可能就是用手捏一捏，甩一甩，也有用拍擊式均質(zhì)器的
5）培養(yǎng)，把事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基（培養(yǎng)基的制備，一般要經(jīng)過配比，高壓滅菌等過程，當(dāng)然也有配制好的商業(yè)培養(yǎng)基，進(jìn)口的有MERCK，國產(chǎn)的也很多，比如陸橋）倒平板，然后劃線培養(yǎng)或者涂抹均勻即可，只要保證盡量把含菌的稀釋液涂抹開，不要有菌落重疊的現(xiàn)象，然后放入恒溫培養(yǎng)箱的進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度與所檢測微生物不同而不同，比如大腸菌群是37度，糞大腸菌群要略高一點(diǎn)，具體多少，我也記得不是很清楚了
常規(guī)菌大概就是這樣啦，目前大多數(shù)檢驗(yàn)單位都在使用這種傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法，其優(yōu)點(diǎn)就是便宜，廉價(jià)，但是比較慢，如今市面上有很多總菌數(shù)和大腸菌群的快速商業(yè)方法，比如3M，他們在紙片上提供現(xiàn)成的培養(yǎng)基，只需把稀釋液直接接種到培養(yǎng)基即可，相比較而言，節(jié)省了我們制備培養(yǎng)基的時(shí)間，不過貌似在培養(yǎng)時(shí)間上并沒有縮短。還有檢測培養(yǎng)基電導(dǎo)率方法來檢測的，因?yàn)榕囵B(yǎng)前，培養(yǎng)基都是大分子物質(zhì)，這些物質(zhì)的電導(dǎo)率相對較低，經(jīng)過微生物代謝后，被分解為小分子物質(zhì)，所以電導(dǎo)率急劇增加，通過建一個(gè)曲線來反推微生物的個(gè)數(shù)。
致病菌的檢測是不得檢出的，所以要比常規(guī)菌要復(fù)雜，所耗時(shí)間更長，有可能還需要用沒有選擇性的培養(yǎng)基進(jìn)行前增菌，然后再用選擇性培養(yǎng)基在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行增菌，如果有可疑菌落再挑取利用生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定。
比如沙門氏菌，檢測流程大致如下：
1）取樣，同常規(guī)菌
2）均質(zhì)，同常規(guī)菌
3）前增菌，先要用無選擇性的培養(yǎng)基進(jìn)行富集增菌，因?yàn)橛锌赡軜悠分兴纳抽T氏菌受傷，或較少，直接用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)的話，沙門氏菌不會生長，從而出現(xiàn)假陰性。
4）增菌，用選擇性的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，這樣大部分的微生物在選擇性的培養(yǎng)基上都不會生長，就如同過濾一樣，如果長菌，根據(jù)菌落形態(tài)學(xué)來判斷到底是否為可疑菌落，如果沒有可疑菌落，可以判定為陰性，如果有，挑取并做生化反應(yīng)鑒定是否是真的沙門氏菌。
掌握好這些恒溫培養(yǎng)箱的使用方式，可以讓我們在細(xì)菌檢測的過程中，更加的準(zhǔn)備，迅速。