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的細(xì)胞毒性檢測試劑盒^PLUS乳酸脫氫酶（LDH），可以進(jìn)行均勻的格式，需要從細(xì)胞沒有轉(zhuǎn)讓和離心步驟，以分離上清液。的顯色反應(yīng)可以停止用于定義測定條件。樣品材料：生長的細(xì)胞培養(yǎng)在96 -或384 -孔板可以直接測量。等分從其他格式的生長的培養(yǎng)可以不除去細(xì)胞的情況下轉(zhuǎn)移到96 -或384 -孔板用于測量，測定時間： 10?30分鐘進(jìn)行孵化。靈敏度：少于100的溶解的細(xì)胞中可檢測到一個96孔的板。


 

細(xì)胞死亡是經(jīng)典的質(zhì)膜傷害的定量評價。廣泛使用的方法是基于差分吸收或排除的染料，如臺盼藍(lán)（trypan blue）和碘化丙啶，然后用顯微鏡計(jì)數(shù)。主要的缺點(diǎn)是，這些方法不容許大樣本號碼的處理。另一個組的檢測的基礎(chǔ)上釋放的放射性的同位素如[ ⁵¹訓(xùn)練班]和[ 3 H ] -胸苷或熒光染料從prelabeled靶細(xì)胞。這些檢測方法的缺點(diǎn)是（i）該使用的放射性同位素在大部分時間里，（ⅱ）用于預(yù)標(biāo)記的靶細(xì)胞的必要性，以及（iii）高大多數(shù)標(biāo)簽從的prelabeled的靶細(xì)胞自發(fā)釋放的甲第三類型的檢測是基于對測量細(xì)胞質(zhì)受損細(xì)胞釋放的酶的活性。酶釋放試驗(yàn)已被描述（例如，堿性和酸性磷酸酶），然而，它們的使用是由低有關(guān)的酶的量是本在許多細(xì)胞阻礙，并且由精心制作的定量酶活性所需的動力學(xué)分析。與此相反，乳酸脫氫酶（LDH）是一種穩(wěn)定的細(xì)胞質(zhì)酶是存在于所有細(xì)胞。它正迅速釋放到質(zhì)膜的損傷的細(xì)胞時的培養(yǎng)物上清液。

1. 催化劑（心肌黃酶/ NAD ⁺的混合物）
2. 染料溶液（INT和乳酸鈉）
3. 裂解液
4. 一站式解決方案

的培養(yǎng)物與催化劑的制備及染料的基片從該試劑盒中的混合物。對于總細(xì)胞數(shù)的計(jì)數(shù)，在裂解溶液之前加入的底物反應(yīng)。反應(yīng)后，測定被終止通過添加終止液。乳酸脫氫酶（LDH）活性，是由一個耦合的酶促反應(yīng)，從而使四唑鎓鹽INT被還原成甲臜。死或血漿膜損壞的細(xì)胞的結(jié)果，在培養(yǎng)上清中的LDH酶活力增加的量的增加。上清液中的酶活性的量的增加，在有限的時間期間形成的甲（formazan）的量直接相關(guān)。所形成的甲臜染料是水溶性的，并示出了廣泛的大吸收波長為約500nm。對于典型的實(shí)驗(yàn)中，請參閱圖1 -圖3。
 

圖1：從U-937細(xì)胞，在整個細(xì)胞培養(yǎng)物中的不同數(shù)目的總?cè)樗崦摎涿福↙DH）活性測定。此圖顯示了與基板的細(xì)胞毒性檢測試劑盒^PLUS（LDH）的混合物從有5分鐘的溫育后的值。

圖2：此圖顯示了從U-937細(xì)胞，在整個細(xì)胞培養(yǎng)物中的不同數(shù)目的總?cè)樗崦摎涿福↙DH）活性測定。細(xì)胞數(shù)的值的下降，以每孔100個細(xì)胞孵育30分鐘后與基板。

圖3：對U-937細(xì)胞的細(xì)胞毒性活性的放線菌素D的測定不同濃度的放線菌素D，添加到細(xì)胞中，在使用的細(xì)胞毒性檢測試劑盒^PLUS乳酸脫氫酶（LDH）（= LDH ^PLUS）及細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞毒性測定擴(kuò)散試劑WST-1（WST-1）。