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細胞增殖ELISA的BrdU（比色法）屬于改進的第二代的試劑盒用于測定DNA的合成。它被設(shè)計為一個，快速和簡單的比色替代定量基于在復(fù)制（單車）細胞在DNA合成過程中的BrdU摻入測定細胞增殖。因此，細胞的增殖ELISA可用于在體外細胞系統(tǒng)在許多不同的。例如：

• 生長因子和細胞因子誘導(dǎo)的細胞增殖的檢測和定量的
• 環(huán)境和生物醫(yī)學(xué)研究中的各種化合物對細胞增殖的抑制或刺激作用的測定，并在食品，化妝品和制藥行業(yè)
• 測量的有絲分裂原或抗原刺激淋巴細胞的免疫反應(yīng)，
• 不同的細胞生長抑制藥物對腫瘤細胞的化療敏感性，在醫(yī)學(xué)研究中的分析

• 安全：使用放射性同位素
• 準(zhǔn)確：得到的結(jié)果的強烈相關(guān)的增殖細胞的數(shù)目（低的平均偏差）
• 敏感：化學(xué)發(fā)光技術(shù)，提供至少相當(dāng)于[ ³ ?]胸腺嘧啶摻入法測定的靈敏度
• 快速：只在一個單一的步驟中，一個洗滌和兩個保溫步驟的固定和變性，使用的多井的ELISA讀數(shù)器允許更大范圍內(nèi)的被處理的樣本數(shù)
• 方便：試劑提供一個穩(wěn)定的和優(yōu)化的形式，整個試驗是在一個微孔板，溫和的固定及DNA變性維持細胞的形態(tài)
• 功能測試：每批功能測試增殖細胞相比，高手很多

樣品材料：貼壁和懸浮細胞培養(yǎng)在96孔微孔板

細胞的增殖需要的基因組DNA的復(fù)制。因此，監(jiān)測DNA合成是一種間接的參數(shù)的細胞增殖，以及適合的DNA合成的調(diào)節(jié)的研究。[ 3 H ] -胸苷歷來被用于標(biāo)記DNA的復(fù)制（單車）細胞。為了規(guī)避的[ 3 H ] -胸苷，5 -溴-2'-脫氧尿苷（BrdU）的基礎(chǔ)上的非放射性的替代品已開發(fā)的使用相關(guān)聯(lián)的缺點。化學(xué)發(fā)光技術(shù)的使用提供了增強的靈敏度和寬的測量范圍。

1. BrdU標(biāo)記試劑
2. FixDenat，準(zhǔn)備使用的
3. 抗BrdU-POD
4. 抗體稀釋液，準(zhǔn)備使用的
5. PBS洗滌緩沖液，10倍濃。
6. TMB底物溶液，準(zhǔn)備使用的

該測定法的基礎(chǔ)上的BrdU摻入增殖細胞的基因組DNA的檢測。通過加入2 - 24小時的BrdU標(biāo)記細胞生長在96孔組織培養(yǎng)微孔板。這個標(biāo)簽期間，尿嘧啶代替胸腺嘧啶注冊成立的循環(huán)細胞的DNA。除去標(biāo)簽介質(zhì)后，將細胞固定，并在一個步驟中的DNA變性，加入FixDenat。除去FixDenat后，加入抗BrdU-POD抗體，然后綁定到新合成的細胞DNA摻入的BrdU。檢測到的免疫復(fù)合物，通過隨后的底物反應(yīng)。將反應(yīng)產(chǎn)物進行定量通過使用掃描的多井分光光度計（ELISA讀數(shù)器）測量吸光度。