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細菌計數板的使用方法

閱讀:566        發布時間:2015-8-27

細菌計數板的使用方法

準備 
準備計數時,磨光的表面小心地用擦鏡紙擦干凈。蓋玻片也要擦干凈。 

蓋上蓋玻片 

在需要蓋的周邊區域需要用蒸餾水弄的微濕然后蓋玻片要慢慢的從計數板的前端推入,直到蓋玻片的前端邊緣與計數板的劃格子的區域處于同位。 

注意:蓋玻片是很容易壞掉的! 

在外部支持和蓋玻片之間的干擾線(牛頓環)的組成顯示了蓋玻片的準確位置。 

計數板加樣 

取一個良好混合型的吸管并且放置一些初期的幾滴液體。 
把吸管的外部擦干然后保持吸管一定的角度直到小滴液體被吸管吸上去。然后這滴液體被放置在蓋玻片和計數板之間。由于蓋玻片和計數板之間的毛細管現象作用的結果,兩個平面之間的縫隙被灌滿。在溶液要滿出擊數板截面的邊緣之前,馬上移走吸管的。如果有可見氣泡或者液體已經滿出邊緣并且進入其他的溝里,那么計數板就要擦干凈并且重新加樣。 

計數 
裝載好的計數板被放置在顯微鏡臺上然后計數格在低倍鏡焦距中顯示。高倍物鏡要非常小心的操作,因為計數板比常規的要更厚。如果你不小心的話,會導致計數板或者物鏡鏡頭的損傷。 

如果可能的話,在作血細胞計數的時候使用機械平臺的顯微鏡。顯微鏡的照明是重要的,太亮了會影響劃格線的觀察。光可以通過虹膜光圈減弱直到劃得格子在背景中再次清晰可見。細胞/質粒的計數應該充分稀釋到他們不再互相重疊,并且均勻的分配。 

要完成計數檢測需要擴大到期望的可見的細胞/質粒。細胞數量的計算推薦計數100方格作為排除少量的結果。 

計數格在超過劃線區域使用時需要均勻的分配,并且這個通過藉由三倍之數決定的方格支架在進入區段之內。 

計數完100方格后總數除100(計數的方格數),來得到每格的平均值。乘稀釋度,除1/4000(每個小方格的立方容積1/20 x 1/20 x 1/10 – 1/4000mm3)。這次計算得到的數字是原非稀釋流質的每立方毫米的細胞數量。 


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