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特異性神經元抗核抗體（Hu抗體）的檢測
閱讀：689 發布時間：2011-6-30某些神經系統綜合征是由于惡性腫瘤的遠隔影響所造成，稱為神經系統副腫瘤綜合征（paraneoplasticsyndromesofthenervoussystem，PNSNS）。近年來由于發現了特異性的神經元抗核抗體（Hu抗體），因而認為此病與自身免疫有關。Hu抗體實質上為多克隆IsC，能固定補體，可與中樞神經系統及周圍神經系統中所有神經元胞核及小細胞肺癌細胞核起反應，但不與其他組織細胞（如腦膠質細胞，肝、腎等組織細胞）發生反應，并與SLE等結締組織疾病所產生的非特異性抗核抗體有本質上的差別，因此，稱為特異性神經元抗核抗體（Hu抗體）。采用免疫熒光、ELISA法即可測出患者血清中Hu抗體。陳齊鳴等（1996）報道采用先進的親合免疫細胞組織化學ABC法和免疫印跡技術檢測PNSNS患者的Hu抗體，其敏感性和特異性顯著增高。現介紹親合免疫細胞組織化學ABC法檢測Hu抗體。
1．操作步驟
（1）6／1m正常人大腦額葉、顳葉、肝臟、腎臟及Wistar大鼠的大腦、小腦的冰凍切片干燥10min。
（2）丙酮固定10min后用含0．3％H202、1％BSA的PBS處理10min，抑制內源性過氧化物酶。
（3）加10％羊血清／PBS封閉30min后，分別加稀釋的血清、腦脊液或尿液標本在4℃冰箱過夜。
（4）PBS洗5min，更換3次，以下同。加適度稀釋的生物素標記羊抗人IeC（第二抗體），37℃孵育15min。
（5）同上洗滌，加ABC復合物室溫作用15min。
（6）同上洗滌，DAB-H202底物顯色后，常規封片鏡檢。
2．結果顯示
（1）PNSNS患者的血清、腦脊液及尿液中的Hu抗體與正常人和Wistar大鼠所有神經組織中的神經元胞核形成均勻染色，核仁陰性，但不與神經組織中的膠質細胞、肝臟及腎臟組織細胞發生反應，說明該法具有高度特異性。
（2）血清及腦脊液中Hu抗體的滴度zui高可達1：64 000及1：4 000，尿液中Hu抗體滴度達到1：200，說明該法敏感性很高。
（3）以免疫印跡技術測得17例患者血清中的抗體識別神經元胞核中蛋白抗原分子量為350-400kD。
3．臨床意義 通常認為，IgC不能從腎小球濾過，尿中測出IgC型Hu抗體，可能是Hu抗體損害了腎小球，使其通透性增加所致。腦脊液Hu抗體滴度與血清中的抗體滴度無關聯，提示可能有CNS中的局部合成。有76％（13／17）患者以PNSNS起病，并檢出Hu抗體，爾后發現原發灶，說明Hu抗體的測定對于部分癌腫，特別是小細胞肺癌的早期診斷有實際臨床意義。
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