化工儀器網
公司動態
藻紅蛋白作為熒光標記物具有的優點
閱讀：2941 發布時間：2011-1-8 藻紅蛋白或稱藻膽蛋白是一種來源于藻青菌（Cyanobacteria）和真核菌類相當穩定的具有很強溶解性的熒光蛋白。這些蛋白質含有共價連接的四吡咯基團（tetrapyrolegroup），其生物學作用是聚集光，通過熒光共振能源傳遞轉化成一對特殊的葉綠素分子，定位在光合反應中心。
因為具有光收集功能，藻紅蛋白的光吸收和發射熒光zui大，而內部能量傳遞或外界pH值或離子組成對熒光猝滅影響降低到zui小。藻紅蛋白利用共價鍵結合的形式與抗體免疫球蛋白或其他蛋白質結合，形成穩定的復合。
應用其復合物進行免疫熒光組織化學、流式細胞儀和FISH的檢測，對抗原或DNA、RNA進行定量和定性分析，也是雙重標記或多重標記的熒光蛋白。
藻紅蛋白作為熒光標記物具有以下優點。
①具有強的長波長激發和發射熒光，可避免來自其他生物材料熒光的干擾；
②Stokes移位相當大，具*的發射量子產率；
③熒光不被外部試劑猝滅，通過與蛋白質主鏈的共價結合, 熒光基團可被保護.
④具有非常高的水溶性；
⑤有明確分子質量的齊性結構（homogeneousstructure）；
⑥與許多生物學或合成材料的多位點穩定交聯。
藻紅蛋白可分為D—藻紅蛋白（phycoerythin B；B-PE）、R—藻紅蛋白（R-PE）和異位（或別）藻藍蛋白（allophycocyamin；APC）。
（一）藻紅蛋白的光譜特點
各型藻紅蛋白的光量子產率高達o．98，消光系數高達2．4X106cm-1·m01．L-1。以lmol為基準，在可比較的波長，熒光產率等于至少30個未猝滅的熒光黃分子或100個羅丹明分子的熒光產率。
（二）藻紅蛋白的應用
各型藻紅蛋白均有商品化產品，例如二抗標記的B-PE、R-PE和APC，生物素化的B—PE、R-PE和APC，親和素標記的B-PE、R-PE和APC產品。其敏感性APCzui高，其結合物的穩定性B-PE比R-PE更好，但R-PE結合物的穩定性可通過加入1—丙基沒食子酸鹽（propyl gallate）而增強?？膳c其他綠色熒光素標記物進行雙重免疫熒光組化標記。