由于各種人為原因引起的標本溶血，均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為標記的ELISA試劑盒測定中，會導致非特異性顯色。為克服上述干擾作用，標本采集時必須注意避免溶血。
    在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下，正常血液采集后1/2~2h開始凝固，18~24h*凝固。臨床檢驗工作中，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結果；這類情況于次日復查時因血凝已*，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復查結果變為陰性。為避免上述干擾作用，ELISA試劑盒測定試劑盒解決的辦法是血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清，或標本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當的促凝劑。
    抗凝劑、酶抑制劑及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣，ELISA試劑盒亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。