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研域(上海)化學試劑有限公司

ELISA試劑盒陽性對照品和陰性對照品以及參考標準品

時間:2013-10-23閱讀:1561

陽性對照品(positive control)和陰性對照品(negative control)是檢驗試驗有效性的控制品,同時也作為判斷結果的對照,因此對照品,特別是陽性對照品的基本組成應盡量與檢測標本的組成相一致。以人血清為標本的測定,對照品也為人血清,因為正常人血清在各種ELISA模式中可產生不同程度的本底。由于大量正常人血比較難得到,國外ELISA試劑盒中的對照品多以復鈣人血漿(recalcified human plasma)為原料,即在血漿中加入鈣離子,使其中的纖維蛋白質凝固,除去凝塊后所得的液體,其組成與血清相似。陰性對照品須先行檢測,確定其中不含待測物質。例如HBsAg檢測的陰性對照品中不可含HBsAg,抗HBs也是陰性。陽性對照品多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質,其中加入一定量的待檢物質,此量在試劑說明書中標明。加入的量應與試劑的敏感度相稱,在測定中得到的吸光值與受檢標本吸光值比較,可對標本中受檢物質的量有一個粗略的估計。國外檢測HBsAg的ELISA試劑盒檢測敏感度約為0.5ng/ml,陽性對照品中含量約為10ng/ml。在對照品中一般加入抗生素和防腐劑,以利保存。 
定量測定的ELISA試劑盒(例如甲胎蛋白質癌胚抗原測定等)應含有制作標準曲線用的參考標準品,應包括覆蓋可檢測范圍的4-5個濃度,一般均配入含蛋白保護劑及防腐劑的緩沖液中。

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