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研域(上海)化學試劑有限公司

ELISA試劑盒法在實驗中手工測定的影響因素分析

時間:2014-3-18閱讀:920

ELISA試劑盒法多年來廣泛應用于血站和醫(yī)院的實驗室中,相對于其它檢測方法,ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點,并具有操作簡便、無放射性危害的優(yōu)點,但是在一些測定實驗中,結果會出現(xiàn)誤差影響測定結果。這篇文章總結了很多的實驗經(jīng)驗從幾個方面分析影響結果的因素。
ELISA試劑盒法在實驗中手工測定的影響因素分析
(1)抗原、抗體活性對效價的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價降低或失活,結果不易判。(2)加樣時注意勿觸及包被板底部,以免擦傷包被物使抗體(抗原)脫落而影響實驗結果的準確性。(3)洗滌不充分,會使結果假性增高,過分洗滌呈假陰性。(4)比色時應保持包被孔底部無異物、無水汽,特別是冬季板從37℃水浴箱取出時,底部留有水汽,應將板底擦干后進行比色,水汽或孔內氣泡也會使OD值升高。(5)抗原與抗體反應達到*平衡,依賴于溫度與時間。溫度高于45℃易引起失活及標記物脫落,溫度低于4℃,影響反應速度。
如何讓ELISA試劑盒系統(tǒng)在實驗中更穩(wěn)定的方法
檢測系統(tǒng)可謂是免疫學反應應用到科研出產(chǎn)中zui為敏捷的技術手段。自己也為此苦惱過很長一段時間,跟著自己技術水平得進步,或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣,也是熟能生巧吧,現(xiàn)在做方陣,做ELISA已是輕車熟路了,以前檢測一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的,現(xiàn)在給我十個八個的從包被到顯色,一個工作日基本搞定??墒窃谛吕鲜植倏v過程中老是會泛起或大或小的題目,本人在剛開始做ELISA時就面對良多災題,固然有師兄師姐鋪路,但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣,好比說花板,假陽性,全顯色,全部顯色,顯色比空缺還低。

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