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紫外分析儀原理

閱讀:1759        發布時間:2017-12-15

紫外分析儀是熒光技術的應用,熒光技術是什么呢?  首先了解一下什么是熒光,熒光又作“螢光”,是指一種光致發光的冷發光現象。當某種常溫物質經某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后進入激發態,并且立即退激發并發出比入射光的的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);而且一旦停止入射光,發光現象也隨之立即消失。具有這種性質的出射光就被稱之為熒光。  知道了什么是熒光,顧名思義就能想到什么是熒光技術。熒光技術是某些物質受一定波長的光激發后,在極短時間內(10-8秒)會發射出波長大于激發波長的光,這種光稱為熒光。這一發光現象在各方面的應用及有關的方法稱為熒光技術(fluorescent technique)。 

   物質經過紫外線照射后發出熒光的現象可分為兩種情況,*種是自發熒光,如葉綠素、血紅素等經紫外線照射后,能發出紅色的熒光,稱為自發熒光;第二種是誘發熒光,即物體經熒光染料染色后再通過紫外線照射發出熒光,稱為誘發熒光。 

     以往人們常用熒光偏振做指標來研究生物大分子動力學。人們趨于用熒光偏振隨時間的衰減來研究這些問題。在這種方法中,激發光不是一連續的面偏振光,而是一偏振的光脈沖,因此測得的F∥和F是在兩個不同方向上偏振的熒光隨時間的衰減,它既和熒光壽命τ有關,又與分子在溶液中的運動有關,因此常表示為F∥(t)和F⊥(t)。由它們可得一相當重要的物理量——各向異性參數A(t)。由A(t)可推測生物大分子的形狀、分子轉動弛豫時間(即從一個定向的狀態到一個無定向狀態所要的時間),進而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的轉動角度和時間之間的函數關系。由這些結果可以研究分子之間的相互作用、分子間結合的緊密程度、蛋白質、核酸分子的解聚程度等等。  

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