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96孔板質粒DNAout
最近更新時間:2013-6-26
提 供 商:上海研生實業有限公司資料大小:17.6KB
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96孔板質粒DNAout
產品及特點 本試劑盒本產品是基于經典堿變法的高通量質粒DNA提取試劑盒,一次可以處理多達96個樣品,尤其適合處理量大的工業客戶,包括測序公司。本產品的主要特點是:
1. 高通量,一次處理96個樣品。
2. 吸附量高,一個吸附空zui多可以吸附30-50 ug的質粒DNA。
3. DNA純度高,幾乎沒有基因組DNA和RNA污染,OD260/280一般在1.7-1.9之間,完滿足一般分子生物學的要求。
4. DNA可以直接用于電泳、酶切、PCR、細菌轉化、分子克隆等實驗。
5. 重復性和穩定性好。
規格及成分 成份 1次包裝(CAT#:80916-1)
溶液A 25 mL
溶液B 25 mL
溶液C 35 mL
RNase A溶液
(10 mg/mL) 0.3 mL
96孔板(一塊吸附板兩塊收集板) 1套
通用洗柱液 100 mL
DNA洗脫液2.0 10 mL
使用手冊 1份
運輸及保存 常溫運輸和保存;但RNase A溶液放4℃。
自備試劑 無
使用方法 1. 先將菌液轉移到96孔板的一塊收集板中,每個孔中加入0.1-1 mL菌液,直到96個樣品全部加入。
2. 室溫1000-5000×g離心2分鐘,用排槍小心吸棄上清。
3. 用排槍在每個收集孔的細菌沉淀中加0.2 mL的溶液A(使用前需要將0.6 mL的RNase A溶液全部加到30 mL溶液A中并充分搖勻混勻),充分吹打混勻使細菌懸浮。
4. 用排槍在每個收集孔中加0.2 mL的溶液B(如果有沉淀,用前須37℃加熱溶解后冷卻到室溫方可使用),輕柔吹打混勻,直到菌液變得清亮透明。注意:不要劇烈吹打,否則基因組DNA將斷裂成小片段,zui后污染質粒DNA。
5. 用排槍在每個收集孔中加0.3 mL的溶液C,輕柔吹打混勻。冰上放置3-5分鐘。室溫放置也可以,但效果稍差。
6. 室溫1000-5000×g離心5分鐘。
7. 小心用排槍將上清轉移到96孔板的吸附板中,注意孔與孔的對應關系。
8. 套上剛使用過的收集板,室溫1000-5000×g離心5分鐘,棄收集板中的穿透液。
9. 用排槍在每個收集孔中加0.5 mL通用洗柱液,室溫1000-5000×g離心2分鐘,棄收集板中的穿透液。
10. 重復上步操作一次。
11. 干甩一次(不加任何溶液而離心套上收集板的吸附板)以去除殘留洗柱液。注意:此步很重要,否則殘留洗柱液將會嚴重影響質粒DNA的后續使用。
12. 用排槍在每個收集孔中加100 uL DNA洗脫液,室溫放置2-5分鐘。如果65℃預熱DNA洗脫液后再使用,洗脫效果更好。
13. 套上一塊還沒使用的干凈收集板,室溫1000-5000×g離心5分鐘即得質粒DNA。