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超快核酸電泳液（干粉）

最近更新時間：2013-6-27

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相關(guān)產(chǎn)品：

超快核酸電泳液（干粉） 
產(chǎn)品及特點(diǎn)SuperBuffer-2是天澤基因在SuperBuffer基礎(chǔ)上開發(fā)的DNA/RNA兩用快速電泳液。它跟SuperBuffer一樣，能以高達(dá)30 V/cm的電壓電泳，達(dá)到快速電泳的目的。跟SuperBuffer不同的是，本產(chǎn)品對鹽離子濃度敏感度低，同時還能用于RNA電泳。其主要優(yōu)點(diǎn)是:
1.快速，電泳時間短, 對分辨率要求不高的電泳（如PCR和酶切檢測等）甚至可以在5-10分鐘內(nèi)完成。
2.不影響后續(xù)的Southern雜交，DNA膠回收和DNA連接等反應(yīng)。
3.價格與TBE（干粉）相當(dāng)甚至更便宜。
4.DNA膠回收率高于使用TAE和TBE電泳的膠回收。
規(guī)格及成分成份20 L包裝50 L包裝
SuperBuffer-270克180克
使用手冊1份1份

運(yùn)輸及保存常溫保存和運(yùn)輸，有效期兩年。
自備試劑蒸餾水
使用方法一：溶液的配制
將本產(chǎn)品全部加到一個干凈的容量適當(dāng)?shù)娜萜髦校聪卤淼挠昧考尤胝麴s水并在室溫下用磁力攪拌器攪拌，直到干粉*溶解（一般需要30分鐘左右）。
20 L干粉50 L干粉
配法一（配制20X濃縮液）加水1升得到20X濃縮液加水2.5升得到20X工作液
配法二（直接配制工作液）加水20升得到1X工作液加水50升得到50X工作液
注：其他濃度的濃縮液配制可以按比例計算，但濃縮液濃度不能超過20X，否則干粉不能全部溶解。由于干粉含多種未*混合均勻的成份，所以必須一次性全部用于溶液的配制。如果緩沖液（濃縮液或工作液）長時間不用，滅菌后放4℃長期保存。
二: DNA電泳
將SuperBuffer-2濃縮液用蒸餾水稀釋到1X，除了需要使用較高電壓才能得到快速的電泳結(jié)果外，操作跟使用TAE和TBE基本一樣。需注意的地方是：
1.電壓：在SuperBuffer-2溶液中既可以使用常規(guī)電壓，也可以使用較高電壓，只是使用常規(guī)電壓時，其快速的*性就體現(xiàn)不出來。使用較高電壓時，由于各電泳槽結(jié)構(gòu)不同，*電壓需要稍做摸索。*次將工作電壓調(diào)到zui高電壓的80%左右，即平均25 V/cm（電極距離）。對一般minigel，一般可以用250-350V跑5-10分鐘；對大的電泳槽，可用400-450V跑5-10分鐘。每次根據(jù)電泳結(jié)果和緩沖液溫度決定各電泳槽的*工作電壓和時間。一般電壓越高，電泳時間越短。若在電泳時發(fā)生電流或電壓逐漸下降的現(xiàn)象，請檢查電泳儀是否設(shè)置了電流上限或功率上限。緩沖液電泳次數(shù)超過3次或緩沖液中有細(xì)菌/真菌生長也會出現(xiàn)此現(xiàn)象，需要更換新的緩沖液。
2.膠濃度：建議將瓊脂糖凝膠的濃度控制在0.8%左右，對于長度在100 bp以下的DNA 片段，可以將瓊脂糖凝膠的濃度提高到1.2%左右。由于每次溶膠過程中會丟失水份，所以在溶膠后適當(dāng)補(bǔ)充水份（可以前后稱重），否則膠濃度會逐漸增加，DNA的移動速度會減低、產(chǎn)熱會增加。使用0.8%左右的瓊脂糖凝膠的好處是一方面可以節(jié)約膠的用量，另一方面可以使DNA的泳動速度更快，同時還能夠提高DNA的回收率。
3.染色：如果使用EB，把染料加入到融化后的凝膠中（只是EB的終濃度為0.4 -0.5 ug/mL，比使用TAE和TBE時稍高），但也可以加入到電泳緩沖液中或/和電泳上樣液中。如果使用天澤基因低毒染料綠如藍(lán)（DNAGREEN），將染料加入到融化后的凝膠中。如果只有膠中有染料，則長時間電泳后（超過20分鐘），大部分染料在高壓下會與DNA分離，DNA條帶可能會看不見或看起來很淡，此時應(yīng)該再染色一次。在染色液中加入一定的量的NaCl（終濃度≥0.05 mol/L）能提高染色效果。SuperBuffer-2與SYBR Green I也有良好的兼容性，可以結(jié)合使用。
4.DNA條帶扭曲：DNA樣品中所含SDS量過高時（SDS主要來于上樣液）， DNA條帶將出現(xiàn)扭曲，影響實驗效果。建議使用不含SDS的上樣液。
5.反復(fù)使用：1X SuperBuffer-2電泳液至少可以重復(fù)使用2-3次，如果使用大電泳槽，可以重復(fù)使用的次數(shù)會更多。
6.TAE和TBE膠：已經(jīng)用TAE和TBE電泳液配置好的瓊脂糖凝膠可以直接放入1X SuperBuffer-2電泳液中按上述電泳條件電泳，但有時候會有扭曲現(xiàn)象。
三：RNA電泳
跟DNA電泳一樣，必須在使用前用水將SuperBuffer-2溶液稀釋到1X，其使用方法跟DNA電泳的主要區(qū)別是：
1.電壓：RNA電泳時，zui高使用電壓大約只有DNAzui高使用電壓的一半左右，所以一般minigel可以使用150 V左右的電壓。由于各實驗室電泳槽規(guī)格各異，*次電泳時，將工作電壓調(diào)到跟MOPS電泳一樣的電壓，每次再逐漸往上調(diào)電壓和時間，根據(jù)電泳結(jié)果和測定緩沖液的溫度決定今后的工作電壓。
2.RNA上樣液：RNA必須與含變性劑的RNA上樣液混合，并在80℃保溫10分鐘后冰浴2-5分鐘再上樣。不能直接將RNA樣品上樣或使用DNA上樣液，否則電泳不但很難得到清晰的條帶，并且在加樣孔中還會有看似DNA污染的條帶出現(xiàn)。推薦使用天澤基因的RNA變性/上樣/染色三合一即用型溶液RNAON。
3.膠濃度：RNA電泳使用1%-1.5%的瓊脂糖凝膠，用1X SuperBuffer-2配制。
4.染色：同DNA電泳。
 

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