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培養基的滅菌及準備
最近更新時間:2012-4-26
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培養基的滅菌及準備
B.1 大豆酪蛋白瓊脂培養基(TSA)培養基的滅菌及準備
B.1.1 培養基采用大豆酪蛋白瓊脂培養基,可以按以下處方制備,也可使用按該處方的符合要求的脫水培養基。配制后按培養基規定的經驗證合格的滅菌程序滅菌。
B.1.2 大豆酪蛋白瓊脂培養基配方
酪蛋白胰酶消化物………………………………………………………………… 15g
大豆粉木瓜蛋白酶消化物………………………………………………………… 5g
氯化鈉……………………………………………………………………………… 5g
瓊脂………………………………………………………………………………… 15g
純化水…………………………………………………………………………… 1000mL
取上述成分除瓊脂,混合,微熱溶解,調節pH值使滅菌后為7.3±0.2,加入瓊脂,加熱融化后,分裝,滅菌,冷卻至約60℃,在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿(φ90mm1))中。加蓋后在室溫放至凝固。
B.2 沙氏瓊脂培養基(SDA)培養基的滅菌及準備
葡萄糖……………………………………………………………………………… 40g
酪蛋白胰酶消化物、動物組織的胃酶消化物等量混合………………………… 10g
瓊脂………………………………………………………………………………… 15g
純化水…………………………………………………………………………… 1000mL
取上述成分除瓊脂,混合,微熱溶解,調節pH值使滅菌后為5.6±0.2,加入瓊脂,加熱融化后,分裝,滅菌,冷卻至約60℃,在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿(φ90mm1))中。加蓋后在室溫放至凝固。
B.3 培養基平皿培養及保存
制備好的培養基平皿宜在2℃~8℃保存,一般以一周為宜或按提供的標準執行。采用適宜方法在平皿上做好培養基的名稱、制備日期記錄的標記。
1) 如果用其他規格的平皿,可適當增減培養基的量,使之在平皿中形成至少2 mm厚的瓊脂層。