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類黃酮糖基轉移酶(UFGT)測試盒

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【詳細說明】

商品詳情:
類黃酮糖基轉移酶(UFGT)測試盒測定意義:

花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素,屬黃酮類化合物。花色苷廣泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實中,使其呈現由紅到紫等不同顏色,是植物主要的呈色物質。

類黃酮糖基轉移酶(UDP-glycose flavonoid glycosyltransferase, UFGT)是花色苷合成過程的最后一個酶,可以把不穩定的花色素催化成花色苷,在一定范圍內,UFGT活性與花色素苷的合成呈現正相關。

測定原理:

UFGT催化UDPG與槲皮素生成UDP;UDP在酸激酶與乳酸脫氫酶作用下,氧化NADH為NAD+,NAD+生成速度與UDP含量成正比,通過340nm吸光度下降速度反映UFGT活性。

需自備的儀器和用品:

酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、96孔酶標板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。

試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。

標準品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標準液,4℃避光保存。
商品屬性:

貨號

規格

檢測方法

YSH3349

100管/96樣

微量法

YSH3349-1

50管/48樣

紫外分光光度法


測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節波長到570 nm,蒸餾水調零。

2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務必在30min內測完。

3. 標準管:取EP管,加入10μL標準品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A標準管。顯色后務必在30min內測完。

4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務必在30min內測完。

注意:空白管和標準管只需要測定一次。

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