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elisa試劑盒白介素類干擾因素的研究
點擊次數：1133 發布時間：2018-2-28
elisa試劑盒白介素類應用價值。
（2）改變酶標抗體：由于RF結合的是IgG的Fc片段，如果將待酶標的抗體的F，片段酶切去除，僅留下具有特異結合功能的F（ab’）2部分標記酶，則在測定中即可避免RF的干擾。
（3）標本中RF用變性IgG預先封閉：將經熱變性（63℃，10 min）的動物如兔、羊等的IgG加入到標本稀釋液中，或是將該變性IgG連接至一顆粒固相如聚苯乙烯微球或微孔，然后加入臨床血清標本，反應后，再吸出標本進行檢測。此外，在測定特異IgM時，也可使用抗人IgG去除臨床標本中RF和IgG。
（4）測定抗原時，可在標本中加入可使RF降解的還原劑：如2—巰基乙醇。2—巰基乙醇等還原劑可使抗體內的巰基裂解，因而可以去除RF的干擾，但只適用于抗原測定。
（5）包被或酶標二抗使用特異的雞抗體IgY：RF不與雞IgY反應，如果包被和酶標二抗均為雞IgY抗體，則不受標本中RF的干擾。
2．補體 在固相酶免疫測定中，來自哺乳動物的固相特異抗體和酶標二抗均有激活人補體系統的功能。一方面，固相抗體和酶標二抗可因為其在固相吸附及結合過程中，抗體分子發生變構，從而其F，段的補體C1，結合位點被暴露出來，這樣C1，就成為一個中介物將二者交聯起來，從而出現假陽性結果。另一方面，固相抗體也會因為活化補體的結合，封閉抗體的抗原表位結合能力，而引起假陰性結果或使定量測定結果偏低。由補體引起的干擾可通過下述方法避免：
（1）對臨床血清標本加熱滅活補體：采用56~C30 min加熱可使標本中的補體C1。滅活。
（2）包被或酶標二抗使用特異的雞抗體：雞抗體不激活人的補體系統，因此，使用特異的雞抗體，不會出現因補體激活而存在的假陽性和假陰性干擾。
3．異嗜性抗體（heterophilieantibodies） 人類血清中含有抗嚙齒類動物（如鼠、馬、羊等）
的免疫球蛋白（1g）的抗體，即天然的異嗜性抗體。有研究表明，天然的異嗜性抗體（1gG）可分為兩類，一類（85％的假陽性由其引起）可結合于山羊、小鼠、大鼠、馬和牛IgG的Fab區域，但不與兔IgG的Fab區結合。另一類（15％的假陽性由其引起）可結合于小鼠、馬、牛和兔IgG的Fc區表位，但不與山羊和大鼠IgG的Pc區表位結合。異嗜性抗體可通過交聯固相和酶標的單抗或多抗而出現假陽性反應。由異嗜性抗體引起的干擾可通過下述方法避免：
（1）使用特異的兔F（ab’）2。片段作為固相或測定酶標抗體。
（2）在標本或標本稀釋液中加入過量的動物Ig，封閉可能存在的異嗜性抗體。但加入量不足或亞類不同時無效。
（3）使用靶特異的非Ig親和蛋白（affibody）替代固相或酶標抗體之一。采用噬菌體展示技術展示來自單個金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）聯合文庫的人IgA結合親和蛋白，用于IgA的測定，不受異嗜性抗體的影響。
（4）使用elisa試劑盒白介素類特異的雞抗體作為固相和測定抗體。
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