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ELISA試劑盒SCI文章方法分析
點擊次數(shù)：1004 發(fā)布時間：2017-9-1
ELISA試劑盒SCI文章是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。
(一) 原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計，具體的方法步驟可有多種。
(二) 操作步驟
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。
3. 加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. ELISA試劑盒SCI文章結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
Sulfisoxazole Acetyl YSRIBIO171 80-74-0 200mg 磺胺乙酰異噁標準品
YSRIBIO1709 22884-10-2 30mg 唑來瞵酸相關(guān)物質(zhì)A標準品
(+)-Catechin YSRIBIO1708 154-23-4 25mg (+)-兒茶酸標準品
(E)-Thiothixene YSRIBIO1707 3313-27-7 100mg (E)-替沃噻噸標準品
1,4-Benzoquinone YSRIBIO1706 106-51-4 200mg 1，4-苯醌標準品
1,4-Sorbitan YSRIBIO1705 27299-12-3 300mg 1,4-脫水山梨糖醇標準品
1,6-anhydro-D-glucose YSRIBIO1704 498-07-7 50mg 1,6-脫水吡喃葡萄糖標準品
10-Formylfolic Acid YSRIBIO1703 134-05-4 25mg 10-甲酰葉酸標準品
12-Hydroxystearic Acid YSRIBIO1702 106-14-9 200mg 12-羥基硬脂酸標準品
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