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mediomics 1-1-1004說明書

2022-7-13  閱讀(1367)

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mediomics 1-1-1004說明書

mediomics代理——上海起發(fā)

Bridge-It® S-Adenosyl Methionine (SAM) Fluorescence Assay Kit, 384-well format

 


貨號(hào):1-1-1004。類別:384 孔板Bridge-It 檢測(cè)DNA 甲基化,神經(jīng)科學(xué)SAM。標(biāo)簽:384 孔,AdoMet,Bridge-It,S-腺苷蛋氨酸,SAM,SAMe。

Bridge-It® S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 熒光檢測(cè)試劑盒,384 孔格式

應(yīng)用:

  • 定量生物體液、細(xì)胞培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)基以及組織和細(xì)胞提取物中的 SAM 水平

  • 表觀遺傳學(xué)和甲基化研究

  • 許多神經(jīng)和精神疾病,包括阿爾茨海默病、抑郁癥、艾滋病毒相關(guān)的神經(jīng)功能障礙/癡呆、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、脊髓退化、癲癇、纖維肌痛、偏頭痛,以及慢性肝功能障礙、動(dòng)脈硬化和癌癥

 

特征:

  • 簡(jiǎn)單: 將測(cè)試樣品或標(biāo)準(zhǔn)品與檢測(cè)溶液混合并在 ~25°C 下孵育

  • 快速: 孵育 30 分鐘后讀取熒光信號(hào)

  • 靈敏: 測(cè)定法以 0.5 µM 的檢測(cè)下限測(cè)量 SAM(即 96 孔中的 50 pmol/孔或 384 孔黑色微孔板中的 20 pmol)

  • 靈活: 檢測(cè)適用于低通量和高通量篩選形式

 


 

S-腺苷蛋氨酸和 Bridge-It 熒光檢測(cè)的背景信息

S-腺苷蛋氨酸 
S-腺苷甲硫氨酸(也稱為 SAM、SAMe 或 AdoMet)在所有類型生物體的甲基化生物學(xué)過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。在甲基化循環(huán)中,SAM 充當(dāng)甲基的供體,用于 DNA 和蛋白質(zhì)的共價(jià)修飾。SAM 水平的變化與衰老過程、許多神經(jīng)和精神疾病有關(guān),包括阿爾茨海默病、抑郁癥、HIV 相關(guān)的神經(jīng)功能障礙/癡呆、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、脊髓退化、癲癇、纖維肌痛、偏頭痛和還有慢性肝功能不全、動(dòng)脈硬化和癌癥。目前,SAM 使用高壓液相色譜 (HPLC) 方法進(jìn)行量化。HPLC 耗時(shí)、昂貴,而且由于需要大量的有機(jī)溶劑,

 

 

Bridge-It ®  S-腺苷蛋氨酸熒光 (SAM) 檢測(cè)1,2
Mediomics Bridge-It ®  S-腺苷蛋氨酸 (SAM) 熒光檢測(cè)方法基于成熟的熒光測(cè)量技術(shù)和我們獲得的新型檢測(cè)平臺(tái)設(shè)計(jì)的結(jié)合它利用 DNA 結(jié)合蛋白作為它們各自的小分子共調(diào)節(jié)因子(配體)的生物傳感器。DNA 序列特異性 MetJ 蛋白對(duì)其*的 DNA 結(jié)合位點(diǎn)的親和力在其配體 S-腺苷甲硫氨酸的存在下大大增加。對(duì)于該測(cè)定,MetJ 共有序列被分成兩個(gè) DNA“半位點(diǎn)"。一半片段用熒光素標(biāo)記,另一半片段用 Oyster ®  645 熒光團(tuán)標(biāo)記3,4。測(cè)試樣品中 SAM 的相對(duì)量將影響測(cè)定中 DNA-MetJ 蛋白復(fù)合物形成的量。當(dāng)這種復(fù)合物形成時(shí),它會(huì)將熒光標(biāo)記的 DNA 半位點(diǎn)靠近并導(dǎo)致熒光信號(hào)發(fā)射發(fā)生可測(cè)量的變化(增加),這可以使用酶標(biāo)儀輕松測(cè)量(波長(zhǎng)設(shè)置:吸收 485 nm;發(fā)射 665 nm )。然后使用 SAM 標(biāo)準(zhǔn)曲線確定測(cè)試樣品中的 SAM 濃度。Bridge-It ® SAM 熒光檢測(cè)方法表現(xiàn)出非常理想的性能特征,包括高 (>6:1) 信號(hào)與背景 (S/B) 比、寬檢測(cè)范圍 (~0.4 µM – 100 µM) 以及 0.4 µM 的檢測(cè)靈敏度。該檢測(cè)水平 (0.4 µM) 可用于量化大多數(shù)感興趣的測(cè)試樣品中的 SAM,包括生物體液、細(xì)胞培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)基以及組織和細(xì)胞的提取物。

與 HPLC 程序相比,Bridge-It ®  SAM 熒光檢測(cè)方法采用 384 和 96 孔微孔板形式。因此,它非常適合在大量測(cè)試樣品中快速、同時(shí)測(cè)量 SAM 水平。此外,這種方法很容易適應(yīng)目前用于藥物發(fā)現(xiàn)研究的高通量篩選平臺(tái)。

 

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