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celltechnology APODNA說明書
Apo ssDNA™
An antibody assay to detect DNA Damage (Single Stranded) in apoptotic cells
用于檢測凋亡細胞中DNA損傷（單鏈）的抗體測定
PRODUCT CODE: APODNA
產品描述
介紹
用于評估與細胞凋亡相關的DNA損傷的廣泛使用的細胞化學技術是末端脫氧核苷酸轉移酶介導的原位末端標記或TUNEL測定。然而，TUNEL測定法的缺點在于假陽性染色使得測定法不可靠作為細胞凋亡的標記物（參見圖1）1-5。細胞凋亡的一種更普遍和特異的標志物是細胞核中的形態學變化，其反映了染色質凝聚成致密質量6-7
進一步的生物化學和細胞化學研究表明凋亡DNA對熱變性的易感性增加。通過掃描量熱法檢測細胞核以檢測熱誘導的DNA變性和通過電泳分析DNA的片段化分析表明，完整的凋亡DNA在較低溫度下易于變性而非非凋亡細胞變性8
主要優點
- 與TUNEL分析相比，更可靠 - 沒有假陽性信號。
- 讀數 - 流式細胞儀，96孔板讀數器，熒光顯微鏡。
- 產生定量和定性結果。給出了強烈的積極信號。
- 易于使用：結果不到60分鐘。
- 無需運行DNA梯度分析來檢測細胞中的DNA損傷。
分析原則
Cell Technology推出了Apo ssDNA，這是一種基于抗體的檢測方法，用于檢測凋亡細胞中的DNA損傷（單鏈DNA：ssDNA）。
該測定使用針對ssDNA產生的抗體。該抗體僅在凋亡細胞9-12中識別大片熱變性ssDNA
圖（A）。MAb對凋亡但不是壞死細胞的ssDNA染色。在流式細胞儀上產生在甲酰胺中加熱并用MAb F7-26染色的MDA-468細胞的熒光分布。星形孢菌素誘導細胞凋亡，疊氮化na，皂苷或高溫誘導壞死。注意，凋亡細胞被MAb強烈染色，而壞死細胞和對照細胞的熒光譜相似。
圖（B）。細胞凋亡和壞死細胞的TUNEL染色。在流式細胞儀上產生用TUNEL染色的MDA-468細胞的熒光分布。星形孢菌素誘導細胞凋亡，疊氮化na，皂苷或高溫誘導壞死。注意，細胞凋亡早期的細胞（星形孢菌素3小時）被弱染色，而晚期凋亡細胞（星形孢菌素5小時）和壞死細胞被TUNEL 12強烈染色。
套件內容和長期存儲
試劑 | 部分＃ | 溫度 |
小鼠抗單鏈DNA | 部分＃1003 | -70°C等分試樣 |
抗小鼠IgM FITC標記 | 部分＃2005 | -20℃下 |
Fixitive | 部分＃3033 | 4-8℃下 |
10X洗滌緩沖液 | 部分＃3037 | 4-8℃下 |
