細胞培養經常需要獲得單克隆，下面就給大家簡單介紹幾種方法：
方法一：單克隆細胞的培養就是這樣的,我現在作了15個96孔板的單克隆,總共才得到大約50株單克隆在做時候應保證每個孔中的細胞是一個,因此,在200毫升的培養液中加入小于96個的細胞,這樣平均到每個孔中因該可以由滿意的結果培養SPC-A1（人肺癌細胞），轉染了EGFP，然后進行了G418抗性篩選和96孔板單克隆篩選，zui終獲得了成功。
方法二：實驗步驟大致為：預先對96孔板除*排之外的所有孔加含15%胎牛血清的細胞培養液，0.1ml/孔，并放于細胞培養箱中溫育，然后胰酶消化穩定表達GFP的細胞，細胞液稀釋至密度為1000cell/ml的單細胞懸浮液，上述細胞液接種于96孔板的*排，0.2ml/孔，從中吸取0.1ml細胞溶液接種于第二排，混合后，從第二排中吸取0.1ml接種于第三排……，一直到第八排，zui后一排都丟棄0.1ml細胞液。一般來說，每一列都會有某個孔中只有1~2個細胞。
方法三：在顯微鏡下觀察，標記孔中小于10個細胞的孔，然后在顯微鏡下用記號筆在皿底把單個熒光細胞圈住，然后在操凈臺里用滅過菌底牙簽將圈外的細胞戳死，這樣留在孔中的就是單克隆了，通過這樣的，獲得了單克隆。但需注意的是：時間不能超過30min，否則細胞極容易死亡。
解決操作時間長的方法：拿一個96板，在里面隨便種一些細胞，然后用牙簽練習，我練了5～6次后非常熟練了。還有注意培養液：是含15％的胎牛血清，加大營養，有利于細胞生長；另外一種方法是對還沒有變黃的細胞液進行過濾，過濾后的培養含有很多生長因子，可以作為單克隆的培養液。
