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技術詳解：免疫血清純化抗體操作
閱讀：2197 發布時間：2015-3-30
免疫血清 （immune serum）亦稱抗血清。含有抗體的血清制劑。種類很多，包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。關于免疫血清純化抗體的詳細操作步驟我公司專業技術提供專業的技術指導。如下：
1． 剪取一小條0.45 μm 的硝酸纖維膜，置于1.5ml eppendorf 管中，浸沒于1 ml
1 mg/ml 的抗原溶液中，5 min。
2． 取出膜，置于濾紙上干燥。
3． 將膜放置于裝有1 ml Buffer A 的eppendorf 管，輕輕震蕩混勻30 min。
4． 移去Buffer A，用新鮮的Buffer A 洗一次，將膜浸沒于0.8-1 ml 相應的抗血
清中，1-2 h, 于混勻器上輕輕震蕩混勻。
5． 移去血清，用PBS 洗膜，4 次，每次5 min。
6． 洗脫抗體
新配置100 mM 甘氨酸（pH 2.5）抗體洗脫液，將膜置于洗液中，手輕搖
混勻2 min，迅速將洗液轉移至裝有100 μl 1 M Tris（pH 8.0）中和，使抗體
復性。第1 次洗脫用400 μl 抗體洗脫液，第2，3 次用200 μl。
7． 往洗脫下來的液體中加入100 μl Buffer A 以穩定抗體，并分裝成30 μl 每管，
于-20℃保存。
注：所有步驟均在室溫完成。