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RPMI-1640基礎培養(yǎng)基配制等詳細說明書

時間:2014/10/24閱讀:7803
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RPMI-1640基礎培養(yǎng)基是zui常用的一種培養(yǎng)基,由 Moore et al 在1967 年為人的白血球細胞開發(fā)的,并以他所在的研究所(RoswellPark Memorial Institute)而命名。目前用于多種動物細胞的生長。

高壓滅菌型是該培養(yǎng)基的熱穩(wěn)定配方,可保證其營養(yǎng)成份在高壓高熱中不受影響。該配方中不含 L-谷氨酰胺及碳酸氫鈉,需在高溫滅菌后添加。

產(chǎn)品型號

RPMI1640 基礎培養(yǎng)基,含 L-谷氨酰胺,不含碳酸氫鈉

RPMI1640 基礎培養(yǎng)基,含 L-谷氨酰胺,不含酚紅,不含碳酸氫鈉

RPMI1640 基礎培養(yǎng)基,不含 L-谷氨酰胺,不含碳酸氫鈉

RPMI1640 基礎培養(yǎng)基,含 L-谷氨酰胺,含 HEPES,不含碳酸氫鈉

RPMI1640 基礎培養(yǎng)基,高壓滅菌型,不含 L-谷氨酰胺,不含碳酸氫鈉

產(chǎn)品規(guī)格

干粉(1L, 10L 及 100L); 液體(500 ml)

配制方法

干粉培養(yǎng)基的過濾配制

1 將 1 升量的干粉在 950ml 細胞培養(yǎng)級純凈水中*溶解

2 加入 2 克碳酸氫鈉,繼續(xù)攪拌至*溶解

3 用 1N 鹽酸或 1N 氫氧化鈉調整到要求的 pH,并將溶液體積調至1000ml

4 在超凈臺內用 0.22um 濾膜負壓過濾

5 將培養(yǎng)基在 2~8℃避光保存

高壓滅菌型的配制

1 將 1 升的高壓滅菌型干粉在 900ml 細胞培養(yǎng)級純凈水中*溶解

2 將溶液 pH 調至 4.0 并將溶液體積調至 960ml

3 在 121℃,15psi 高壓消毒 5 分鐘

4 將培養(yǎng)基迅速取出,避免過久加熱引起成份分解或液體蒸發(fā)減少

5 待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,無菌操作加入 29.3ml 的無菌 7.5%碳酸

氫鈉溶液,及 10ml 的無菌 200mM L-谷氨酰胺

6 如有必要,用無菌的 1N 鹽酸或 1N 氫氧化鈉調整 pH

7 將培養(yǎng)基在 2~8℃避光保存

自備材料  

細胞培養(yǎng)級或注射級純水  

7.5%碳酸氫鈉溶液(無菌)  

200mM 谷氨酰胺溶液(無菌)  

1 N 鹽酸溶液(無菌)  

1 N 氫氧化鈉溶液(無菌)

質檢指標  

形狀:淡黃色均勻粉末(干粉),澄清透明(液體)  

溶解:干粉按要求溶解后澄清透明  

pH 值:(加碳酸氫鈉前)4.4-5.0(加碳酸氫鈉后)(液體)7.4-8.0  

滲透壓:(加碳酸氫鈉前)230-270(加碳酸氫鈉后)280-320 (液  體)  

菌落:每克小于 100cfu (干粉),無菌(液體)  

細胞生長:正常(干粉及液體)

儲存及注意事項

1 所有的液體及干粉培養(yǎng)基應在 2~8℃避光保存,并在有效期內使用。

2 щ 倇或沉淀。

3 液體培養(yǎng)基的 pH 儲存時會因為二氧化碳的逃逸而發(fā)生改變。建議盡量減少開瓶次數(shù)。

4 滅菌后的液體培養(yǎng)基添加物應無菌并在無菌操作下添加。

5 干粉培養(yǎng)基吸濕性強,極易吸水變質。粉包打開后應全部使用或剩余舍棄。

注意:

本產(chǎn)品于研發(fā)生產(chǎn)使用。

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