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GLuc-ON™ 啟動子克隆采用分泌型的Gaussia熒光素酶（GLuc）作為報告子，可在活細胞中對超過20,000種人源啟動子進行實時活性分析。

可直接用于細胞轉染的GLuc-ON™ 啟動子克隆在GLuc報告基因上游插入一段1.2-1.5 kb的序列。這段插入序列與位于特異人源基因轉錄起始區上游大約1.5kb到下游200bp之間的5'序列*。由于這段模擬的順式作用元件存在于克隆的啟動子區域內，我們可以通過觀察熒光素酶的活性來研究人源細胞中啟動子對基因的調節作用。

美國GeneCopoeia可提供已構建好的GLuc-ON啟動子克隆，同時可提供客戶定制構建服務。我們既可以提供單報告基因載體系統，也可提供雙報告基因載體系統。單報告基因載體系統以Gluc或GFP作為啟動子報告基因；雙報告基因載體系統以Gluc作為啟動子報告基因，以分泌型堿性磷酸酶（SEAP）作為信號標準化的內參。

圖1. GLuc-ON™ 啟動子克隆工作流程

優勢

Gaussia 熒光素酶

GLuc-ON™啟動子克隆采用經過修飾的GLuc（mGLuc）作為報告基因，能產生強烈且穩定的熒光信號，克服了人源野生型GLuc（wtGLuc）信號衰退快等缺點。

圖2. mGLuc （藍色） 和 wtGLuc （紅色）的信號穩定性。左側：含有穩定劑的分析緩沖液；右側：常規分析緩沖液。

雙報告系統

雙報告系統也適用于GLuc-ON™ 啟動子克隆。分泌型堿性磷酸酶（SEAP）作為第二個報告子可作為內參，也能對多樣本常規轉染進行精確比較。

圖3. 啟動子在H1B1B 和 HEK293T細胞中的活性分析。雙報告基因啟動子克隆或對照一式兩份轉染進兩種細胞中。轉染24小時（（HEK293T）和48小時（H1B1B）后分析樣品。NEG（包含非啟動子序列）和EMPTY（載體不含啟動子）作為陰性對照。