cDNA克隆的構建過程

首先是逆轉錄酶和cDNA*鏈的合成。逆轉錄酶是DNA或者RNA依賴的DNA聚合酶，可以利用DNA或者RNA合成DNA。cDNA的克隆主要是通過寡聚胸腺嘧啶從3’A尾巴開始合成cDNA，但這樣得到的cDNA克隆中有10%~15%沒有3’端的序列；6到9個核苷酸隨機引物也可用于逆轉錄的反應中，這對于長轉錄本5’端的擴增很有利，但是這樣的方法不能得到全長cDNA；其次是合成cDNA第二鏈。單鏈cDNA3’端的發(fā)卡結構，便于DNA聚合酶I發(fā)揮5’→3’聚合酶活性，合成cDNA的第二鏈；zui后將雙鏈cDNA克隆到質(zhì)粒和噬菌體載體中進行擴增，zui后進行測序，研究轉錄本的信息以及功能。 

復能基因cDNA克隆特點

• 源于高質(zhì)量的cDNA文庫，外源片段插入?yún)^(qū)為全長轉錄本

• 保證ORF區(qū)序列的準確性

• 所有的基因全為NCBI標準

• 克隆易于在大腸桿菌保存和擴增基因

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cDNA 克隆載體

* 本產(chǎn)品僅供研究、不用于臨床診斷