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技術文章

如何避免抗體的冷凍和融化損傷

閱讀:2754          發布時間:2015-7-16

 花大價錢買的抗體如果由于由于保存不當導致抗體壞掉,未免有點得不償失,如何防止這樣的事情發生呢,今天就讓上海恒遠與您一起來分享一下,防止抗體的冷凍和融化損傷的方法。重復冷凍/融化循環可使抗體變性,導致其形成使抗體結合能力降低的聚集物。

 存于 -20℃ 對于大多數抗體是適當的;保存于 -80℃無明顯優勢。冰箱不能為無霜型。 這些冷凍和融化之間的循環(以減少結霜)恰恰是應該避免的。出于相同原因,抗體試劑瓶應置于具有zui小溫度波動的冰箱區域,例如朝冰箱后部放置而不是置于門架上。

有些研究人員加入冷凍保護劑甘油達到 50% 的終濃度以防止冷凍/融化損傷;甘油可將凝固點降低至低于 -20℃。雖然這對于很多抗體是可接受的,但是只有一小部分我們提供的抗體測試了在該保存條件下的穩定性,并且我們的保證僅適用于按數據表上推薦的方式保存的抗體。不建議將包含甘油的溶液保存于 -80℃,因為該溫度低于甘油的凝固點。請注意甘油可被細菌污染。如果加入甘油或任何冷凍保護劑,則應當小心操作,以得到無菌制備物。應避免抗體在稀釋至工作濃度后在 4℃ 下保存超過一天。蛋白質在高濃度下保存時一般不易降解,理想的濃度為1 mg/ml 或高這是在抗體溶液中加入蛋白質例如 BSA 作為穩定劑的理論基礎。加入的蛋白質也有助于減少抗體因結合于容器壁上而造成的損失。對于打算進行偶聯的抗體而言,由于穩定蛋白質會與抗體競爭,降低了偶聯的效率,所以不應加入穩定蛋白質。

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