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三月技術總結交流ELISA標準曲線的繪制
閱讀：812 發布時間：2015-3-30 在綿綿春雨的伴隨之下，三月已經接近尾聲了。在這個月中，您都有哪些收獲呢？上海恒遠公司結識了幾位客戶，并為湖南科技學院李老師、山東大學齊魯醫院王老師、山西醫科大學傅老師等36位客戶解決實驗技術問題。今天上午，我公司歐陽博士對三月技術做出總結，與大家交流ELISA標準曲線的繪制。
一、ELISA標準曲線繪制方法
①ELISA實驗中樣品都要做復孔或三孔，然后計算每個濃度標準品的平均OD值，復孔的變異系數應該小于20%。
②平均OD值減去空白孔的OD值。
③制作標準曲線。
以減去本底后的OD值為X軸，標準品的濃度為Y軸，利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖，比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法（比如直線、半對數、對數、四參數方程等）并從中選擇一條zui合適的方程。要想檢驗某條曲線是否與表中數據吻合，可以將標準品的濃度作為未知數，將對應的OD值帶入該方程，計算出標準品的濃度，得到的結果應該與實際濃度很接近（+/-10%）。選擇擬合度zui高的那條曲線。
二、測定多個酶標板時是否可以使用同一條標準曲線？
在測定不同板中的樣品時，每一個板都對應一條標準曲線。技術錯誤或者不同的孵育情況，環境條件都會引起酶標板之間產生不同結果。一條標準曲線測定的樣品值必需是在相同環境下產生的，否則就是無效值。
三、溫馨提示
如果樣品的OD值超過標準曲線的zui高值，在實驗前應該先將樣品稀釋從而得到準確的濃度。樣品的zui終度應該是計算出的濃度乘以稀釋倍數。
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