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免疫膠體金固定劑的選擇與使用方法

閱讀:167          發布時間:2015-7-21
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免疫膠體金銀染色和其它免疫細胞化學方法一樣,要想得到好的染色效果,關鍵取決于標本處理是否適當,只有使抗原性及組織結構保存的好,才能使后續的染色成功成為可能,其次要用高特異性和價的一抗,選擇合適的稀釋度。由于免疫組化方法廣泛應用于不同的生物學科,所要檢出的抗原種類繁多,性質也各不相同。因此,不可能有一種適用于所有抗原的固定劑,而是根據不同的抗原性質區別對待。根據我們使用的固定劑介紹如下,僅供參考。

固定劑的選擇及其相應的固定時間

1)酶:冰凍切片不固定,或用95%乙醇,固定時間為10min

2激素:冰凍切片、涂片、印片,不固定或bing酮、甲醇、乙醇、PEG固定。固定時間為4*30min

3免疫球蛋白:中性福爾馬林、四lv化碳(1%甲醛),固定時間為30min。

4)白蛋白:95%乙醇含15%冰醋酸。固定時間為30min。

5)纖維蛋白原:95%乙醇含1%5%冰醋酸。固定時間為30min。

6)病毒:bing酮、100%乙醇、甲醇、yi醚。固定時間為30min。

7)糖蛋白:PLP、bing酮。固定時間為30min。

8)脂質: Forssman 中性福爾馬林。固定時間為20min。

9)抗原: 2.5%硫代硫酸鈉,冰凍切片不固定。固定時間為20min

10)免疫電鏡:PLP、戊二醛、戊二醛-多聚甲醛、ECD-G等。固定時間為30min。

切片的處理與粘附

免疫組化染色過程較復雜,洗滌的次數較多,而且均需振蕩洗滌,抗原片粘貼不牢,往往在zui后的時刻,還沒有等顯色就會脫落導致前功盡棄,這個環節雖小卻會影響大局。因此,為了保證切片染色成功,必須把切片處理好,解除脫片的后顧之憂。


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