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的ELISA實驗如何執行操作
閱讀：1061 發布時間：2014-9-16 在策劃實驗之前首要就要了解到該實驗的復雜性，雖說ELISA操作簡單，卻步驟多而復雜，的ELISA實驗如何執行操作？上海恒遠教您幾招實驗注意：
看似很無聊，其實很重要的洗滌步驟中，如果未結合的材料殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。如有必要，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結合反應。如果背景過高，而您懷疑洗滌不夠時，可以嘗試增加洗滌次數。
洗板方法有手工與自動兩種，在加樣步驟中注意：吸嘴的潔凈與否和吸量的準確性，直接影響檢測結果。由于吸嘴構造特殊，導致清洗困難，加大了交叉污染的機會。建議用一次性吸嘴。加樣器也要經常清洗，定期校準。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出。
試劑盒規格有96T與48T兩種，上海恒遠所提供的高質量進口試劑盒供實驗室研究使用，需要在2-8℃溫度中保存，有效期為半年，也就是6個月。
1. 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
2. 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
3. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
ELISA包被用抗原或抗體的濃度，包被的溫度和時間，包被液的pH等應根據試驗的特點和材料的性質而選定。抗體和蛋白質抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液，也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后，在4-8℃冰箱中放置一個晚上，37℃中保溫2小時被認為具有同等的包被效果。包被的zui適當濃度隨載體和包被物的性質可有很大的變化，每批材料需通過實驗與酶結合物的濃度協調選定。
能夠熟練的掌握好ELISA實驗的每一步注意與技巧之后還怕結果不佳？配上上海恒遠ELISA試劑盒定能助您實驗成功！
