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Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒
培養(yǎng)基的過濾澄清
液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無顯著沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。
瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復(fù)過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃ 的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶內(nèi),裝入量不得超過燒瓶容量的1/ 2 ,每1000ml 培養(yǎng)基加入1-2個雞蛋的蛋白.強力振搖3-5 分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。
若能自行沉淀者,亦可靜置冰箱中1-2日、吸取其上清液即可。
培養(yǎng)基 - 成分
培養(yǎng)基的成分包括:碳源、氮源、礦物質(zhì),以及其他必需物質(zhì)。這些成分通過生物反應(yīng)過程,生物物質(zhì)、生物化工產(chǎn)品,并放出CO2、H2O和熱量。 培養(yǎng)基的成分還可以由發(fā)酵過程中所需的元素出發(fā),如C、H、O、N、S、P、Mg、K等。此外,必要時還有一些需要量很少的微量元素,如Fe、Zn、Cu、Mn、Co、Mo、B等。在發(fā)酵過程中某些生物本身不能合成的物質(zhì),如氨基酸、維生素或核苷酸等,必要時亦作為營養(yǎng)物質(zhì)加入到培養(yǎng)基中。
碳源
具有雙重作用。生物在產(chǎn)生生物物質(zhì)或生物化工產(chǎn)品過程中,它不僅為其提供碳源,也為其提供能源。碳水化合物是微生物發(fā)酵中的主要碳源,包括淀粉、葡萄糖、蔗糖和乳糖等。此外,植物油如豆油、棉籽油、玉米油等亦常被應(yīng)用作為碳源。這類油常與表面活性劑合用,以消除發(fā)酵過程中所產(chǎn)生的泡沫。甲醇可用以生產(chǎn)單細胞蛋白。正烷烴類可用以生產(chǎn)有機酸、氨基酸和維生素等,甚至二氧化碳也可作為光合細菌的碳源。
氮源
包括無機氮源和有機氮源。無機氮源包括氨、銨鹽及硝酸鹽等,它們在被應(yīng)用時應(yīng)注意發(fā)酵中pH的變化;有機氮源包括氨基酸、蛋白質(zhì)及尿素等,有機氮源的加入往往加快了生物的生長。因考慮到成本因素,一些有機氮源,如黃豆餅粉、花生餅粉、棉籽餅粉、玉米漿、魚粉、酵母粉等常被選用。
培養(yǎng)基的組成中除了水分外,碳源和氮源的含量是zui大的。碳源含量一般不超過10%,氮源含量較低,一般碳氮比應(yīng)為3~4:1。碳、氮源含量不能過高的原因是避免產(chǎn)生基質(zhì)或產(chǎn)物對反應(yīng)的抑制和因滲透壓過高引起細胞失水而死亡。