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干貨:細胞培養出現沉淀,什么原因?
閱讀：4562 發布時間：2019-6-19細胞培養是實驗中的重中之重，細胞沒有培養好實驗記性不了，細胞培養好了，為后面的實驗打下了雄厚的基礎！那細胞在培養中出現了沉淀，什么原因造成的呢？您知道嗎？好了，不賣關子了，恒遠邀您一起來看看！
細胞培養中的沉淀
如果排除了污染，細胞培養基中的渾濁通常被解釋為金屬、蛋白和其他培養基組分的沉淀。沉淀物可能損害細胞健康，因為他們通過螯合可移除養分和其他需要的組分，從而改變培養基的組成。沉淀物也是顯微鏡可見的，可能會干擾依賴成像的實驗分析。
產生沉淀的可能原因
一、溫度變化
在細胞培養中，溫度是引起沉淀的主要因素之一。當遭遇溫度的變化時，高分子量血漿蛋白會從溶液中析出；熱失活和凍融循環能促進蛋白降解和沉淀；因為液體或重組成培養基在使用之間保持冷藏儲存，鹽可能沉淀，尤其是10x或其他濃縮的儲存液。
二、失水誘導的濃度改變
如果培養基可能蒸發，培養基組分(包括鹽) 的濃度將會增加，特別是培養基表面可能容易形成晶體沉淀。
三、鈣鹽
制備無血清培養基時，組分添加的順序可能導致不可溶分子的形成。鈣鹽尤其容易沉淀，比如CaCl2和MgSO4在溶液中反應產生CaSO4晶體。高壓滅菌和pH值不穩定會加劇這一問題。
四、金屬補充物
銅、鐵和鋅等金屬離子是細胞生長所必需的，是無血清培養基的重要補充物。培養系統中其他血清組分的缺失可能導致這些金屬沉淀，為細胞形成有毒的環境。在較高pH環境下(一般>8時)，碳酸鹽和氫氧根離子與銅離子、磷酸鹽和氫氧根離子與鐵離子、碳酸鹽、磷酸鹽和氫氧根離子與鋅離子、氫氧根離子與鎂離子易形成不溶性沉淀物；在氧化條件下，銅和鋅更易于沉淀。
五、污染
培養物渾濁可能是細菌或真菌污染造成的。
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