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ABI Veriti96孔梯度PCR儀中文說明書

閱讀:3695        發布時間:2019-8-15

操作步驟:

1、打開PCR儀的熱蓋,插入0.2ml的樣品管。蓋好熱蓋。

2、打開PCR儀的電源,儀器程序開始初始化,需等待幾分鐘。

3、初始化完成后,顯示主菜單:

4、點“Browse/New Methods”,進入PCR程序列表:

 

5、可以直接點一個PCR程序,選擇“Start Run”運行;點右邊的符號,可以選 擇不同的文件夾。如要新建一個PCR程序,點“New”,出現PCR程序:

 

6、添加一段程序:點中上方的“Stage”位置,該位置變紅;再點“Add”,軟件將加入一段新的程序。

 

7、修改循環數、溫度、時間:點中循環次數、溫度或時間位置,下方出現數字鍵。依次點數字鍵,出現合適數字后,點“Done”確定。

 

8、增加一個步驟:點“Step”位置,該位置變紅;再點“Add”,軟件將加入一個新的步驟。

9、刪除一個步驟:點“Step”位置,在點“Delete”,軟件將該步驟刪除。

 

10、建立梯度模式:

 

                    1)點中一個步驟,再點“Option”鍵,出現選項如下

                    2)點“VeriFlex step”,出現梯度創建窗口:

輸入6個梯度溫度,溫度下方的“1-2”是指對應的1、2兩行加熱孔,全部輸好后,點“Done”確定。注意:相鄰的兩個梯度溫度之差不能*過5℃!

11、建立漸變模式:

                    1)點中一個步驟,再點“Option”鍵,出現選項如下

                    2)點“Auto Delta”,出現漸變模式創建窗口。

點“Staring Cycle”,輸入起始循環數;點“Delta Temperature”,輸入溫度變化值;點“Delta Time”,輸入時間變化值。漸變模式適用于touchdown PCR,可以提高PCR反應的特異性。例:輸入起始循環數為2,溫度變化值為+0.5℃,時間變化值為+5s,則表示從第2個循環開始,每循環一次升溫0.5℃,時間增加5s。

 

12、增加暫停步驟:

 

                   1)點中一個步驟,再點“Option”鍵,出現選項如下

 

                   2)點“Pause”,出現如下窗口。

 

輸入暫停的起始位置,暫停間隔和暫停時間,點“Done”確定。上圖表示每隔10個循環暫停10s,在10個循環的第1個循環之前暫停。

13、編輯PCR程序完成后,點“Save”保存。

 

點“Run Method”,輸入PCR程序名稱;點 ,選擇保存PCR程序的文件夾(如 果要保存在USB文件夾中,需要先插U盤)。再輸入反應體積和熱蓋溫度(這兩項在運行程序時可以修改)。點“SaveδExit”確定。

 

14、回到PCR程序列表界面,選擇新建的PCR程序。

 

15、點“Start Run”,出現運行參數設置窗口

 

 輸入反應體積和熱蓋溫度,點“Start Run Now”開始運行PCR程序。

16、儀器運行選中的PCR程序,顯示運行監視窗口

                    A- 運行狀態欄,顯示運行溫度和剩余時間

                    B- 加熱警示標記

                    C- 階段指示

                    D- 步驟溫度

                    E- 步驟時間

                    F- 步驟指示

                    C- 狀態報告,顯示日期、時間和儀器狀態

                    D- 延伸箭頭,點箭頭可以顯示更多的步驟 

 

16、暫停運行:  點“Pause Run”,儀器暫停,出現暫停選項欄

  “Remaining Time”顯示暫停剩余時間,“Elapse Time”顯示已暫停時間。 

如果需要修改暫停時間,點 ,輸入時間值,點“Done”確定;點“Resume Run”, 結束暫停,繼續運行PCR程序。

7、終止運行:點“Stop”可以終止整個PCR程序。

18、反應報告:

    PCR程序結束后,儀器會自動生成反應報告,顯示當次反應的各項指數。該報告可以保存和打印。

19、PCR反應結束后,打開熱蓋,取出樣品,關閉儀器電源。并開蓋放置,使熱蓋和加熱模塊正常降溫

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