藥篩自動(dòng)化先鋒
CyBio FeliX助力細(xì)胞活力檢測(cè)
背景：
基于細(xì)胞表型的藥物篩選是當(dāng)前藥篩的重要方法，是將擬設(shè)計(jì)的藥物所作用的靶細(xì)胞為研究對(duì)象，去評(píng)估藥物對(duì)細(xì)胞活力的影響，這是更接近生理?xiàng)l件的藥物篩選模型，可以很好地模擬藥物在體內(nèi)的作用情況。 主要方法是應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲取所需細(xì)胞，將這些細(xì)胞與候選化合物相互作用，通過(guò)顯微鏡或酶標(biāo)儀收集產(chǎn)生的信號(hào)，測(cè)定化合物的作用能力，從而對(duì)化合物進(jìn)行篩選。
1. 需要進(jìn)行大量化合物的篩選，人工操作工作效率低；
2. 每個(gè)化合物都要進(jìn)行技術(shù)重復(fù)，人工加樣誤差大；
3. 基于細(xì)胞表型的化合物篩選對(duì)于環(huán)境潔凈度有很高的要求。
為解決以上難題，德國(guó)耶拿CyBio FeliX攜手Promega RealTime-Glo™ MT 細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒打造自動(dòng)化實(shí)時(shí)細(xì)胞活力檢測(cè)平臺(tái)。CyBio FeliX不僅可以降低人工操作在移液工作中帶來(lái)的差異，保證精確度；減少用戶投入實(shí)驗(yàn)的時(shí)間和精力，提高整體工作效率，協(xié)助快速篩選藥物；且德國(guó)耶拿CyBio FeliX的無(wú)外殼型號(hào)主機(jī)可以直接放進(jìn)生物安全柜，滿足細(xì)胞實(shí)驗(yàn)所需要的高潔凈度要求。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：
使用Promega的 RealTime-Glo™ MT 細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒，并利用 CyBio-FeliX進(jìn)行移液工作，對(duì)喜樹(shù)堿（一種 DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 抑制劑，以劑量依賴性方式誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡）以4倍稀釋倍數(shù)連續(xù)稀釋8次，每個(gè)濃度做6個(gè)重復(fù)，進(jìn)行 3 次獨(dú)立的細(xì)胞活力測(cè)定（A、B、C）。 使用的細(xì)胞是U2-OS細(xì)胞（人骨肉瘤上皮貼壁細(xì)胞）。記錄處理后的第 24、30 和 48 小時(shí)的發(fā)光情況。繪制每次測(cè)定的 log10[喜樹(shù)堿] 的細(xì)胞存活率百分比。報(bào)告每個(gè)獨(dú)立測(cè)定（A、B、C）和每個(gè)孵育時(shí)間的回歸變量以及測(cè)定批內(nèi)的變異系數(shù)。
圖1 基于Promega的RealTime-Glo™ MT 細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒搭配德國(guó)耶拿CyBio FeliX全能型移液工作站進(jìn)行實(shí)時(shí)細(xì)胞活力檢測(cè)的工作流程圖。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖2在CyBio-FeliX上進(jìn)行自動(dòng)RealTime-Glo™ MT細(xì)胞活力測(cè)定結(jié)果圖譜，R^2^值表示回歸與實(shí)際數(shù)據(jù)的擬合，且通常接受的批內(nèi) CV% 值為 ≤10%。
根據(jù)結(jié)果可得，CyBio FeliX能夠很好地完成實(shí)時(shí)細(xì)胞活力檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中的移液工作，結(jié)果的精確度在可接受范圍內(nèi)。說(shuō)明在CyBio FeliX的助力下，不僅消除了繁瑣多變的手動(dòng)液體處理工作，為研究人員提供了無(wú)人值守的便利，同時(shí)還能產(chǎn)生一致且可重復(fù)的結(jié)果。
CyBio FeliX全能型移液工作站
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