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上海研謹生物科技有限公司

B95-8絨猴EBV轉化的白細胞

時間:2015-3-25閱讀:1590
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細胞名稱          B95-8絨猴EBV轉化的白細胞 

種屬            絨猴 

組織來源          外周血 

生長狀態          懸浮細胞 

培養條件          培養基類型:RPMI1640培養基 

              FBS:10% 

              抗生素:雙抗 

              培養條件:37℃,CO2:5% 


傳代方法          收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態: 

                  如果沒長滿,將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮 

              培養液,繼續培養。 

                  如果細胞已經長滿(約80%-90%)則傳代后繼續培養。 

              貼壁細胞傳代方法: 

              1棄去培養基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。 

              2加1ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細胞接觸 

              后放入37℃培養箱內,隨時觀察細胞狀態變化,待細胞大部分變 

              圓后加*培養基終止消化。 

              懸浮細胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。 

              1直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3, 

              吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續 

              培養。 

              2離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內,1000rpm, 

              5分鐘,去除上清,加新的培養液到離心管內,吹打細胞形成細胞 

              懸液后,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。 

               一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。 

凍存方法          70%*培養基,20%FBS,10%DMSO,現用現配。 

              儲存:液氮中長期保存。 

注             1觀察細胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。 

              2在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發生部分脫落,可 

              離心吹打后重新種入瓶中培養。 

              3收到細胞后若發現培養瓶破損、細胞污染等,請在一周內與我們 

              。

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