一、溫度
在不同溫度下，同一介質的折光指數不相同，因此必須在同一溫度條件下才能比較不同介質的折光指數大小。透明材料的折光率與其溫度和構成均有密切的關系。通常測定溶劑的折光率，溫度范圍在(5-30)℃范圍內。阿貝折光儀應在相應溫度下放置兩個小時后才能用來測量。
二、入射光波長
介質對不同波長光線傳播速度的影響不同，因此用不同波長的入射光測同一介質的折光指數則各不相同。阿貝折射儀是通過阿米西色散棱鏡選擇鈉黃光的D線589.3mm為入射光
三、相對濕度
相對濕度的要求：<85%3折光儀的標準工作曲線首先在常壓、溫度為30℃時，用阿貝折射儀測定不同比例濃度二元混合溶液的折射率，確定溶液摩爾組成與折射率的關系，得到該溫度下溶液摩爾組成與折射率的標準曲線。
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