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上海寶葉生物科技有限公司
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【試劑盒名稱】
豬腫瘤壞死因子α（TNF-α）定量檢測試劑盒（ELISA）
【試劑盒用途】
定量檢測豬血清、血漿及相關液體樣本中腫瘤壞死因子α（TNF-α）的含量。
【檢測原理】
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。將標準品、待測樣本加入到預
先包被豬腫瘤壞死因子α（TNF-α）單克隆抗體透明酶標包被板中，溫育足夠時間后，洗滌除
去未結合的成分，再加入酶標工作液，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分。依次加入
底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉化為藍色產物，在酸的作用
下變成黃色，顏色的深淺與樣品中豬腫瘤壞死因子α（TNF-α）濃度呈正相關，450nm 波長下
測定OD 值，根據(jù)標準品和樣品的OD 值，計算樣本中豬腫瘤壞死因子α（TNF-α）含量。
【試劑盒組成】
備注：標準品（1 號→6 號）濃度依次為：200、100、50、25、12.5、6.25 ng/L.
【需要而未提供的試劑和器材】
1、37℃恒溫箱
2、標準規(guī)格酶標儀
3、精密移液器及一次性吸頭
4、蒸餾水
5、一次性試管
6、吸水紙
【操作步驟】
1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30 分鐘。
2、配液：用蒸餾水將20 倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、
待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先
1 酶標包被板12 孔×8 條7 顯色劑A 液6mL
2 標準品0.3mL×6 管8 顯色劑B 液6mL
3 20 倍濃縮洗滌液25mL 9 終止液6mL
4 樣本稀釋液6mL 10 說明書1 份
5 特殊稀釋液6mL 11 封板膜2 張
6 酶標試劑6mL 12 密封袋1 個
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