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上海寶葉生物科技有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 一個月 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
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產品介紹
MagVigen™ – Plasma DNA Capture
產品內容
MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲納米顆粒
裂解緩沖液
蛋白酶K
蛋白酶 K 緩沖液
洗滌緩沖液 1 庫存
洗脫緩沖液
所需材料
異丙醇
乙醇
十二烷基硫酸鈉，20%
磁性架（NVIGEN Cat# A20006）
MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲試劑盒 (K61003) 能夠從血漿和血清中捕獲小的循環游離 DNA (>30bp)。
Protocols
準備血漿樣品：如果使用冷凍血漿，請在室溫下解凍。將血漿以 12000x g 離心 5 分鐘，以去除任何血液和細胞碎片。
制備裂解緩沖液：如果有固體，則在 60°C 下加熱幾分鐘以制成澄清溶液。
制備蛋白酶溶液：將蛋白酶 K 緩沖液添加到蛋白酶 K 粉末瓶中。渦旋混合均勻。儲存于-20°C。
制備洗滌緩沖液 1：根據表 1 計算所需量。向每 550 ul 洗滌緩沖液 1 原液中添加 450 ul 異丙醇。每次都新鮮制作緩沖液。
檢查表1的總體積來決定使用的離心管類型（1.5ml、2ml、5ml、15ml或50ml）。
將蛋白酶 K 溶液添加到樣品管底部，將血漿添加到管中。渦旋 5 秒以充分混合，短暫離心。
將 20% SDS 添加到管中。渦旋 5 秒以充分混合，短暫離心。
將裂解緩沖液添加到管中。渦旋 1 分鐘以充分混合。短暫地旋轉下來。 60°C 孵育 30 分鐘。
添加 MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲納米顆粒。輕輕搖動小瓶使其分散。然后加入異丙醇，渦旋混勻，短暫離心，繼續渦旋 45 分鐘。
將反應管放在磁力架上沉淀珠子，直至溶液澄清（10-20 分鐘，具體取決于磁鐵的強度和樣品體積）。
慢慢除去上清液。小心不要帶走任何珠子，盡可能多地除去溶液。將磁力架敲擊固體表面，使殘留溶液沉降到管底，除去所有上清液。
將管從磁鐵上取下，添加洗滌緩沖液 1。通過移液或渦旋混合。如果從較大的 15 或 50 ml 試管開始，請將溶液轉移到 1.5 或 2 ml 試管中。短暫地旋轉下來。將珠子放在磁力架上沉淀（約 10 分鐘），除去上清液。將磁力架敲擊表面。除去所有上清液。
使用 75% 乙醇清洗珠粒。不需要全分散珠粒。管子可以通過磁力架保持在適當的位置。稍微向前和向后傾斜裝有樣品管的磁力架。然后短暫旋轉，使蓋子中沒有溶液殘留。將珠子放在磁力架上（約 3 分鐘）并除去所有上清液。在固體表面上敲擊磁力架，使上清液殘留物沉降到管底部。除去所有上清液。
使用 75% 乙醇再次清洗珠粒。將珠子沉淀（約 2-3 分鐘）并除去所有上清液。
將管子放在磁力架上，風干沉淀以蒸發所有乙醇。這需要 2-3 分鐘。
將所需量的洗脫緩沖液添加到珠子中，上下移液直至所有沉淀物全重新分散。將珠子分散在洗脫緩沖液中 3 分鐘。
短暫地旋轉下來。然后將管子放在磁力架上 2-3 分鐘。
收集上清液，不要干擾磁珠沉淀。上清液含有提取的DNA。吸取 DNA 溶液進行下游實驗時，將管子放在磁鐵旁邊。提取的 cfDNA 溶液如果不立即使用，可保存在 -20°C。
MagVigen™ – Plasma DNA Capture
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