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ELISA試劑盒法細(xì)胞凋亡檢測操作步驟:

1.收集細(xì)胞，離心后，用200μl溶細(xì)胞緩沖液重新懸浮，室溫下作用30min。（培養(yǎng)細(xì)胞的上清液、血漿和血清都可作為檢測樣本)

2.取樣品離心后(1 000r/min,10min),吸取20μl上清液，加入鏈霉親合素包被的培養(yǎng)板孔中。

3.加入80μl免疫反應(yīng)試劑含抗-DNA-POD、抗組蛋白-生物素及溫育緩沖液(按1︰1︰18混合)，室溫下孵育2h(置搖床上，250r/min)。

4.ELISA試劑盒取上清，用300μl溫育緩沖液洗滌3次，小心移去洗滌液。

5.加入100μl底物緩沖液，室溫下孵育使顏色變化至適合(置搖床上)。

6.ELISA試劑盒盡快作比色分析(10min～20min內(nèi))，用底物緩沖液作空白對照，以波長405nm，參考波長492nm進(jìn)行檢測。