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技術文章

ELISA常用方法優勢劣勢對比

閱讀:656          發布時間:2016-7-11

一、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。ELISA試劑盒

優勢:操作手續簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。

劣勢:試驗中的一抗都得用酶標記,但不是每種抗體都適合做標記,費用相對提高。

二、間接法:此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標記,改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

優勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應性。

劣勢:交互反應發生的機率較高。

三、雙抗體夾心法:被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其中一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量;或不標記,再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位。

優勢:高靈敏、高專一性,抗原無須事先純化。

劣勢:抗原一定得擁有兩個以上的抗體結合部位。

IGF2R    胰島素樣生長因子2受體抗體
IKZF3    鋅指蛋白Aiolos抗體
SOX13    胰島細胞抗原抗體12/核轉錄因子SOX13抗體
INSC    有絲分裂相關蛋白INSC抗體
phospho-IKKi    磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體
RanBP7    RAN結合蛋白7抗體
IGSF9B    免疫球蛋白超家族成員B抗體
IHPK3    六磷酸肌醇激酶3抗體
IFNK    干擾素kappa蛋白抗體
IL-1 Alpha    白介素1α/IL-1α抗體
IL-1 Alpha    白介素1α/IL-1α抗體
phospho-IL2 Receptor beta     磷酸化白介素2受體β鏈抗體
INSL3    胰島素樣蛋白3抗體
IRE1a    內質網核信號轉導蛋白a1抗體

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