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ELISA試劑原位雜交防止污染
閱讀：218 發布時間：2016-7-13 ELISA試劑盒防止污染：
由于在手指皮膚及實驗室用玻璃器皿上均可能含有RNA酶，為防止其污染影響實驗結果，在整個雜交前處理過程中都需要戴消毒手套，實驗所用玻璃器皿及鑷子都應于實驗前一日置高溫烘烤（180℃）以達到消除RNA酶的目的。雜交前及雜交時所用的溶液均需經高壓消毒處理。
雙鏈DNA探針和靶DNA的變性：
雜交反應進行時，探針和靶核酸都必須是單鏈的。如果用雙鏈DNA探針進行雜交（包括檢測RNA時），雙鏈DNA探針在雜交前必須進行變性。探針變性后要立即進行雜交反應，不然解鏈的探針又會重新復性。
雜交液：
ELISA試劑盒雜交液內除含一定濃度的標記探針外，還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛血清白蛋白及載體DNA或RNA等。
雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加，可以減低探針與組織標本之間的靜電結合。甲酰胺可使Tm降低，雜交液中含每1%的甲酰胺可分別使RNA:RNA，RNA:DNA，DNA:DNA的雜交溫度降低0.35℃，0.5℃和0.65℃。所以，雜交液中加入適量的甲酰胺，可避免因雜交溫度過高而引起的組織形態結構的破壞以及標本的脫落。硫酸葡聚糖能與水結合，從而減少雜交液的有效容積，提高探針有效濃度，以達到提高雜交率的目的（尤其對雙鏈核酸探針）。在雜交液中加入牛血清白蛋白及載體DNA或RNA等，都是為了阻斷探針與組織結構成分之間的非特異性結合，以減低背景。
ELISA試劑盒探針的濃度：
探針濃度依其種類和實驗要求略有不同，一般為0.5-5.0μg/ml（0.5-5.0ng/μl）。zui適宜的探針濃度要通過實驗才能確定。
探針的長度：
一般應在50-300個堿基之間，zui長不宜超過400個堿基。探針短易進入細胞，雜交率高，雜交時間短。
GANC α-葡萄糖苷酶C抗體
GHRHR 生長激素釋放因子受體抗體
GAPDHS 3-磷酸甘油醛脫氫酶抗體
GAPex5 Rab5激活蛋白6抗體
GAS41 NuBI蛋白結合蛋白1抗體
GSDML GSDML蛋白抗體
phospho-GATA2 (Ser401) 磷酸化GATA結合蛋白2抗體
phospho-GATA3 (Ser308) 磷酸化GATA結合蛋白3抗體
phospho-GATA4 (Ser105) 磷酸化GATA結合蛋白4抗體
GATM GATM蛋白抗體
GARB1 γ1氨基丁酸受體GABAA Rβ1抗體
GPATCH2 G蛋白修補結構域蛋白2抗體
GPX1 谷胱甘肽過氧化酶1