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了解細胞培養基的方法

閱讀:69          發布時間:2014-9-15

    了解細胞培養基的方法影響細胞培養的因素很多,讓我們先從培養基和血清說起。以前大部門實驗室都是用干粉培養基,但配制過程就較為繁瑣,要溶解、調pH值,過濾,過程中可能會產生一些濃度誤差,而且有些實驗室的水質并不理想,所以培養的效果會有差異。經典的培養基有良多種,Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。了解細胞培養基的方法由于試劑、水、不同批號的血清之間都存在著差異。別小看細胞培養,這里可蘊含著大學問。選擇你感愛好的細胞類型,它就會彈出推薦的培養基、血清和轉染試劑等,有時還有優化好的轉染步驟,很方便。 
    假如你是著手建立一種全新細胞的培養體系,根本找不到任何參考,那你就得花點時間自己試驗了。要進步培養基的不亂性,可以從培養基和血清兩方面入手。假如使用液體培養基,這種人為的誤差會減少,由于究竟是大批量產業化出產的,批間差會很小。了解細胞培養基的方法細胞培養是實驗室里zui常見和zui基本的實驗了,但卻不是zui簡樸的。有時候細胞狀態不好,轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做??傊?,MEM做貼壁細胞培養、RPMI 1640做懸浮細胞培養會是一個好的開始。 Sigma上也有一個Media Expert,包括了培養基所有成分的功能描述、使用推介和參考文獻等,它仍是一個解決能手,對于細胞培養中的常見題目,如細胞貼壁不好、培養基變色等,它都會列出可能的原因,并提供補救辦法。 HyClone和Invitrogen都在海內建立了液體培養基的出產基地,出產和運輸本錢大幅降低,所以現在的價格也只是50-60元/500ml,比干粉培養基貴不了多少,而且還幫你省了過濾器和時間。大家是不是感覺液體培養基會貴很多,以前是這樣,但現在非也。有時候你會驚奇地發現你的*培養前提與文獻報道的不同,就算是統一種培養前提,細胞的生長狀態也時好時壞,這是很正常的。你也可以購買幾種培養基來,然后花大約兩周的時間做一個簡樸的細胞生長實驗,來選擇其中的。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應用zui廣泛的培養基?;蛘哒业较嚓P的文獻,作為參考。在MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很輕易生長。

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