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高品質Ⅰ型膠原吡啶交聯終肽ELISA試劑盒低價格人ICTP試劑盒,慧穎訂購: 56980388 !
產品名稱:人Ⅰ型膠原吡啶交聯終肽(ICTP)ELISA試劑盒
規格:48T/96T
價格:1200元/1800元
方法:定量ELISA(雙抗夾心法)
試劑盒原理:本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預 先包被人Ⅰ型膠原吡啶交聯終肽(ICTP)單克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后, 洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依 次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物,在酸 的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中人Ⅰ型膠原吡啶交聯終肽(ICTP)濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據標準品和樣品的OD值,計算樣本中人Ⅰ型膠原吡啶交聯終 肽(ICTP)含量。
試劑盒主要操作步驟:
1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本:取足夠數量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、
待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先 加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙
上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。
7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙
上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,平板混勻器混勻30s
(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。
10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。
11、測定:以空白孔調零,在終止后15分鐘內,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、計算:根據標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣
本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。
試劑盒檢測范圍:0.25-8μg/L,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(0.25-8μg/L范圍內),乘以總稀釋倍數即為樣本zui終濃度。
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