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Trypsin1:250 胰蛋白酶1:250

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  • 北京諾博萊德科技有限公司
  • 2024-08-25 16:33:24
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【簡單介紹】

說明:可用于制備單細胞懸浮液。
CAS#:9002-07-7
性狀:由豬胰提取而得的一種肽鏈內(nèi)切酶,淡黃色粉末。不溶于乙醇、甘油、氯仿。等電點pI 10.5。Ca2+對酶活性有穩(wěn)定作用;重金屬離子、有機磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制劑對其活性有強烈抑制
特性:糜蛋白酶(U/mg)≤75
水分(%) ≤5.0 胰島素(U/mg) >250
R:36/37/38-42/43 S:36/37/

【詳細說明】

Trypsin1:250 胰蛋白酶1:250 說明:可用于制備單細胞懸浮液。

CAS#:9002-07-7
Trypsin1:250 胰蛋白酶1:250性狀:由豬胰提取而得的一種肽鏈內(nèi)切酶,淡黃色粉末。不溶于乙醇、甘油、氯仿。等電點pI 10.5。Ca2+對酶活性有穩(wěn)定作用;重金屬離子、有機磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制劑對其活性有強烈抑制
特性:糜蛋白酶(U/mg)≤75
水分(%) ≤5.0 胰島素(U/mg) >250
R:36/37/38-42/43 S:36/37/39
使用說明:胰蛋白酶在用于細胞培養(yǎng)時,可用PBS溶解成濃度
為0.25%,也可以加入0.02%EDTA ,過濾除菌后使用,溶
液為-20℃保存
儲存條件:2-8℃
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溶解方法1:用90ML無Ca、Mg離子PBS溶解胰蛋白酶,再加該PBS至100ML(該酶溶解較難,必要時在4度過夜以便溶解)。用時調(diào)PH7.2左右,用5.6%NaCO3調(diào)
溶解方法2:維持反應(yīng)鍋內(nèi)溶液80℃的溫度至少半小時,然后由夾層通入自來水降低鍋內(nèi)溶液溫度至 50 ℃,按 1∶30的酶/底物比加入需要量的胰蛋白酶,在攪拌器連續(xù)攪拌下開始酶解反應(yīng),期間調(diào)整通入反應(yīng)鍋夾層的蒸汽量使溫度維持在50℃。酶解反應(yīng)過程中,為保證胰蛋白酶的zui大生物活性使反應(yīng)液的pH維持在8.0,這就需要不斷在反應(yīng)液中加入NaOH稀溶液。自加入胰蛋白酶起6h后酶解反應(yīng)結(jié)束
溶解方法3:準確稱取NaCl 8.00g,KCl 0.40g、Na2HPO4·7H2O 0.09g、KH2PO4 0.06g、酚紅0.01g、NaHCO3 0.35g,溶解于約800mL五蒸水中,充分溶解后定容至1000mL,分裝,滅菌備用,制成D-hanks液。準確稱取胰蛋白酶0.125g,溶解于100mL D-hanks液中,于4℃過夜,過濾分裝,-20℃保存?zhèn)溆?/span>
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